吴 宁，马 永，翟秀宇，张玉玲，张 勇，张祺祺，杭化莲，夏 强，卞建民*

    过表达肝细胞核因子4α脐带间充质干细胞促进小鼠大部肝切后肝再生

    吴 宁1，马 永1，翟秀宇2，张玉玲3，张 勇1，张祺祺4，杭化莲4，夏 强4，卞建民1*

    (1南京医科大学附属南京医院普外科，南京 210006；2吉林大学第一医院泌尿外二科，吉林 130021；3遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室，遵义 563003；4上海交通大学医学院附属仁济医院肝脏外科，上海 200127)

    探讨人源性脐带间充质干细胞(UC-MSC)以及过表达肝细胞核因子4α(HNF4α)的UC-MSC能否促进小鼠大部肝切后肝再生。体外分离、培养、鉴定人UC-MSC，慢病毒转染过表达HNF4α。体外收集细胞培养上清液，将L02与上清液共培养，通过细胞增殖实验试剂盒(CCK8)检测细胞增殖活性。体内实验建立肝大部切除模型(约70%)，分别经尾静脉向肝切除小鼠移植0.9%生理盐水(NS)、MSC、MSC-HNF4α。48h后比较3组肝切后肝再生的变化，通过免疫组化来观察肝标本Ki67的表达。成功分离鉴定UC-MSC，并且成功建立稳定过表达HNF4α的MSC。体外实验MSC组和MSC-HNF4α组中L02的增殖能力都明显高于NS组(<0.01)，MSC组高于MSC-HNF4α组(<0.05)。同样体内实验相对于NS组，经MSC或MSC-HNF4α细胞处理的肝脏，其Ki67的表达明显高于NS组(<0.01)，同样MSC组高于MSC-HNF4α组(<0.05)。UC-MSC和过表达HNF4α的MSC都分泌一系列因子促进肝再生。

    小鼠；肝再生；间充质干细胞；肝细胞核因子4α

    肝脏作为机体重要的代谢器官，在受到各种因素的损伤后表现出极强的自我修复能力。虽然肝细胞属于终末分化细胞，生理条件下主要处于静息状态，但一旦肝受到损伤后便会通过各种途径对受损肝进行代偿修复，在短期恢复原来大小，以满足机体需求[1]。然而很多严重肝损伤及肝衰竭患者，肝再生能力无法满足机体需求，既不耐受肝切除手术，也因为不能获得及时进行原位肝移植的机会从而错失治疗时机。

    间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSC)作为一种多能干细胞，具备强大的增殖能力、多向分化能力以及免疫调节能力，已获广泛认可。目前，很多学者将目光投向采用MSC治疗各种类型的肝脏疾病，结果证明MSC能够改善多种肝脏疾病[2?4]。MSC移植治疗丙肝性肝硬变等在临床试验中也均取得了较好的疗效[5] ......