刘礼军，杜万红,*，刘小阳，张 勇，郭 赛，罗昔金

    十两茶提取物抗氧化型低密度脂蛋白诱导的内皮细胞衰老机制研究

    刘礼军1，杜万红1,2*，刘小阳2，张 勇2，郭 赛1，罗昔金1

    (1湖南师范大学第二附属医院老年病科，长沙 410003；2解放军第163医院老年病科，长沙 410003)

    探讨十两茶提取物对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导衰老细胞模型的影响及其可能的机制。将人脐静脉内皮细胞(HUVECs)株于含有10%牛血清的DMEM培养液中培养，使用ox-LDL孵育建立衰老细胞模型，用β?半乳糖苷酶染色法评价内皮细胞的衰老状态，分别予以不同剂量十两茶提取物及辛伐他汀预处理，检测培养液中活性氧(ROS)、非对称二甲基精氨酸(ADMA)、二甲基精氨酸二甲胺水解酶(DDAH)以及端粒酶活性水平。ox-LDL诱导的内皮细胞衰老模型中β?半乳糖苷酶染色阳性的细胞数量显著增加，细胞内ROS水平、ADMA水平增强，DDAH和端粒酶活性降低，而十两茶提取物预处理可明显抑制这一过程(<0.05)。十两茶提取物在ox-LDL诱导的内皮细胞衰老进程中起抑制作用，其机制可能与降低细胞内ROS、ADMA水平以及提高DDAH水平和端粒酶活性有关。

    十两茶提取物；内皮细胞；衰老；抑制

    十两茶产于湖南安化一带，是安化的传统黑茶，又名花卷茶，因每卷茶的净含量为过去的十两而得名。有文献报道，十两茶提取物在动物模型中能改善血管内皮依赖性舒张功能，并有抑制动脉粥样斑块形成的作用，还能显著降低血脂和非对称二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine，ADMA)水平[1]。本实验使用氧化型低密度脂蛋白(oxidative low density lipoprotein，ox-LDL)诱导建立人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVECs)株衰老模型[2]，对模型细胞添加十两茶提取物进行处理，研究其在内皮细胞衰老进程中的作用和机制，为心血管疾病的治疗和预防提供一定的依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验试剂和仪器

    HUVECs(北京肿瘤研究所)；DMEM培养基(美国Gibco公司)；辛伐他汀[3](德国默克公司)；牛血清(杭州四季青公司)；胰蛋白酶(美国Sigma公司)；活性氧检测试剂盒(碧云天生物研究所)；十两茶(湖南茶叶股份有限公司白沙溪茶厂)提供；倒置相差显微镜(日本Olympus公司) ......