血小板功能评价方法
激活剂,全血,活化,1血小板聚集功能分析方法,1光比浊法,2VerifyNow系统,3Plateletworks分析仪,2基于凝血块形成及稳定性的分析方法——血栓弹力图,1原理介绍,2优缺点,3临床应用,3流式细胞仪,4剪切力诱导血小板聚集
于 茜,王 凡,刘宏斌(解放军总医院南楼心血管内科,北京 100853)
血小板作为血液中一种特殊的细胞成分,广泛参与了炎症、宿主防御、组织修复等生理过程,但最重要的仍是参与正常的止血功能[1,2]。因此,抗血小板治疗广泛发展与应用的同时,利用血小板功能检测方法监测抗血小板治疗的有效性及识别动脉疾病高风险患者越来越重要。随着对血小板多方面功能的认识以及社会科技进步,出现了各种基于不同原理的检测方法。但由于技术处理或原理的单一性,目前大多处于实验室研究阶段,临床应用受限。本文对近年来实验室或临床的常用设备作一综述,综合分析利弊。
1 血小板聚集功能分析方法
1.1 光比浊法
1.1.1 原理介绍 20世纪60年代,Born设计了光比浊法(light transmission aggregometry,LTA),其作为血小板检测方法的金标准直到现在地位仍是不可动摇的,是很多鉴别和诊断血小板功能缺陷的专业实验室最为常用的方法[3]。LTA的测试原理是计算富血小板血浆(platelet rich plasma,PRP)样品的透光度变化。PRP是含有大量悬浮细胞的浑浊溶液,悬浮细胞会大大减少光的透射。血小板聚集堆在激活剂加入后出现,悬浮细胞沉淀,光透射增加(100%设定为乏PRP),随血小板聚集实时测量动力学变化。设备配备自动设置功能(透光度为100%及0%的条件)、存储软件和配有搅拌棒的一次性比色杯。设备将获得信号自动转化为曲线图形,与透光度的变化平行。在PRP中,不同的激活剂加入可致不同的血小板途径活化,从而可了解血小板功能的不同特性。最常用的激活剂有二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)、花生四烯酸(arachidonic acid,AA)、胶原和肾上腺素。
1.1.2 优缺点 LTA能用多种激活剂及不同浓度引发血小板激活及聚集,因此提供了学习更多血小板激活途径细节的机会;且因LTA与出血及缺血事件相关,成为在过去50年里大多数专业实验室备受欢迎的检测方法[4]。尽管LTA被认为重要且全面,但还是存在一些特殊问题:(1)受不同的分析前条件(如:抗凝血药类型、血浆脂质、溶血、低血小板计数)影响;(2)不同的程序条件(如PRP的准备、不同浓度的激活剂)易造成误差;(3)在完成实验和解释结果中,需实验室人员具备良好的技术、经验和专业知识;(4)试验中的条件未能精确模拟生理条件[3,4]。因此,LTA需要不断地被发展的标准化过程验证[5]。
1.1.3 临床应用 LTA是血小板检测方法的金标准 ......
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