林梦娇，田倪妮，魏 玲*，朱向情，杨晓华，田 青，曹 帅，阮光萍，潘兴华*

    (1昆明总医院地方干部病房，昆明 650032；2昆明市第一人民医院心内科，昆明 650011；3云南省干细胞工程实验室，昆明 650032)

    慢性缺氧是多种心血管疾病及心室重的诱因，是发病的重要环节，尤其对于老年患者，慢性缺氧可致多种心血管疾病[1，2]。热休克蛋白47(heat shock protein 47，HSP47)是一种高度保守的分子蛋白，既往研究表明其是胶原的特异性分子伴侣，在胶原分泌、合成及其所致纤维化中起重要作用。慢性缺氧可引起明显的肺动脉高压以及右心室重构，甚至最终发展为心力衰竭[3，4]。本研究通过建立慢性缺氧SD大鼠模型，测定HSP47 mRNA表达量及Ⅰ型前胶原C端原肽(procollagen Ⅰ C-propeptide, PⅠCP)及Ⅲ型前胶原N端原肽 (procollagen Ⅲ N-propeptide，PⅢNP)的含量，探讨其与心肌纤维化的相关性。

    1 材料与方法

    1.1 低氧环境的建立和依据

    参考Bonnet等实验[3-5]改良缺氧箱。缺氧箱箱体系统主要由动物饲养箱体和箱内气路组成。氧气浓度控制系统由高压氮气气瓶、电磁阀、氧浓度控制器、气体流量控制器组成，置于箱体的上部。设置箱体内的氧浓度后，整个系统由氧气浓度控制系统自动控制。智能控氧仪位于箱体上部，实时检测箱体内氧含量，并显示在智能控氧仪屏幕上，当箱体内氧浓度高于设置值时，电磁阀开启，充氮气进入箱体，充气速度由气体流量计控制，当氧浓度低于设定值时电子阀自动关闭，停止氮气输入。使箱体内氧气浓度保持在一定范围内。

    1.2 实验动物分组

    40只SPF级的雄性SD大鼠适应性正常饲养1周，按随机数字表完全随机分为5组，每组8只。对照组不给于缺氧处理(A组)。各慢性缺氧组大鼠放入缺氧箱中，向箱中快速通入氮气, 控制气流流量(0.09～0.1)m3/h，箱内氧气浓度从20.95%开始下降，控制氧浓度为10%±0.5%，分别缺氧 7 d(B组)、14 d(C组)、21 d(D组)、28 d(E组)。每天早上8∶00～8∶30开箱放气，清理粪便，补给食物和水，其他时间模型组大鼠均饲养于缺氧箱中。

    1.3 实验方法

    1.3.1 心肌组织总RNA的提取 从-80℃冰箱中取出心肌组织，移到液氮预先冷却的研钵中，边加液氮边研磨至样品成白色粉末。待液氮挥发完后，加入2 ml Trizol(Takara,9109) ......