苟田田，陈 敏，王亚斌，韩 东，乔红玉，黄 旭，许梦琪，汪 奇，戴志飞，冯旭阳*，曹 丰*

    (1第四军医大学西京医院心血管内科，西安 710032;2解放军总医院心血管内科，北京 100853;3北京大学工学院，北京100871)

    2015年中国心血管病报告显示，心血管病为我国居民的首位死因，占疾病死亡构成的40%以上，而冠心病更是威胁居民健康的第二大疾病，其中急性心肌梗死死亡率自2005年始呈快速上升趋势[1]。急性心肌梗死多由冠状动脉粥样硬化不稳定斑块在多种诱因下破裂导致冠状动脉阻塞引起，因此，早期评估不稳定斑块刻不容缓。

    当今应用于临床的诊疗手段尚存在一定缺陷，如冠状动脉造影、冠状动脉CT造影(coronary computed tomography angiography，CCTA)和血管内超声(intravascular ultrasound，IVUS)等虽然可以评估斑块解剖结构，但对斑块内早期分子事件无法检测。新兴的分子影像技术从分子生物学水平对生物内环境变化进行识别及量化，近年来在更加精细化的诊断及治疗中呈现出良好的应用前景[2]。

    不稳定斑块由薄纤维帽、包含脂质和活化巨噬细胞的较大坏死物核心及微钙化构成[3]。骨桥蛋白(osteopontin，OPN)是一种磷酸化糖蛋白，动脉粥样硬化发生时巨噬细胞、血管平滑肌细胞及内皮细胞均有表达，我们前期研究结果表明在由巨噬细胞吞噬脂质形成的泡沫细胞中OPN表达明显增加[4-6]。超声对比剂有很好的临床应用前景，本研究以OPN为靶点，将OPN抗体与包裹全氟溴辛烷(perfluorooctyl bromide，PFOB)的聚乳酸纳米颗粒(poly lactic acid nanoparticles，PLA NPs)偶联，制备靶向超声造影剂，并对造影剂的体外寻靶及成像能力进行初步验证。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    小鼠单核/巨噬细胞系 RAW264.7购自美国ATCC细胞库。PLA购自山东省医疗器械研究所，PFOB、聚乙烯醇、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)、1-(3-二甲氨基丙基)3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)、2-(N-吗啡啉)乙磺酸(MES)购自美国Sigma公司，二氯甲烷购自国药试剂公司，NH2-PEGCOOH购自北京凯正公司，标记别藻青蛋白(allophycocyanin，APC)的OPN抗体、小鼠IgG抗体购自北京博奥森公司，CCK-8试剂盒购自日本同仁公司。超声波破碎仪购自美国 Misonix公司(Sonicator 4000) ......