姜之歆，王从容

    (上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科，上海市糖尿病研究所，上海市糖尿病重点实验室，上海市糖尿病临床医学中心，上海 200030)

    随着组织工程相关研究与日俱增，干细胞治疗越来越被关注[1,2]。干细胞自我更新及体外多向分化能力旺盛，可间接分泌多种细胞因子和调节免疫，常被用来作为治疗疾病的种子细胞，其中用于神经细胞移植疗法的主要有胚胎干细胞(embryonic stem cell，ESC)、神经干细胞(neural stem cell，NSC)以及其他来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cell，MSC)[3-5]。ESC取材不易和伦理问题限制了其广泛应用，NSC需自体有创取材，提取与培养均十分不易。目前已有研究证实骨髓来源的MSC可在体外成功分化为神经细胞[6,7]，在细胞治疗中被广泛研究。人尿源干细胞(human urinary stem cells,hUSC)因便于取材、来源简易、安全无创等特点，临床应用前景广阔[8-10]。Zhang等[11]首次报道从人尿液中分离获得一种具有多向分化潜能的干细胞，并鉴定了其 MSC的生物特性，表达CD29、CD44、CD73、CD90等MSC标志物，并可体外成功分化为脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞等。目前对hUSC分化为神经细胞的相关报道较少，且结果不一。为进一步研究hUSC分化为神经细胞(包括NSC、胶质细胞、神经细胞)的可行性，本研究对既往文献中报道的经典MSC成神经诱导液，以及hUSC成神经诱导液成分做了整合调整，对hUSC向神经类细胞定向分化潜能进行了研究，以期为hUSC在中枢神经系统疾病方面的应用提供新依据。

    1 材料与方法

    1.1 hUSC的培养和传代

    我们收集了3例健康成人无菌新鲜中段尿液200 ml，加入5 ml青链霉素混匀，分装至4管50 ml离心管，400转/min离心10 min后弃上清，加入20 ml磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline，PBS)吹打混匀，继续400转/min离心10 min，弃上清，hUSC培养基重悬后接种于0.1%明胶包被的6孔板中(2 ml/孔)，在37℃、5%CO2培养箱静置培养 ......