邓加雄，王香，李桂成，李云峰

    (湖南省郴州市第一人民医院重症医学科，郴州 423000)

    急性肺损伤(acute lung injury,ALI)是临床上常见的危重症，由于其治疗药物相对缺乏，具有极高的死亡率[1-3]，因此研究缓解ALI的有效药物具有重要的临床意义。虎杖苷是从中药虎杖的根茎中提取的单体，在抗休克、炎症及治疗烧伤方面有显著作用[1,2,4]。我们的前期研究表明[5]，虎杖苷可以减轻脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)介导的ALI中细胞凋亡及炎症反应，但机制并不明确。另有研究表明，线粒体损伤是ALI发病过程中的重要环节，抑制线粒体损伤可以减轻ALI发病[6,7]。而虎杖苷可以通过激活沉默信息调节因子2相关酶3(silent information regulator 2 related enzyme 3,SIRT3)保护线粒体，从而减轻失血性休克导致的肠损伤[4]。我们假设虎杖苷可通过SIRT3抑制线粒体损伤改善ALI，并通过LPS刺激A549细胞模拟ALI的体外实验加以验证，探讨虎杖苷对LPS介导的线粒体损伤的影响，并进一步分析SIRT3在其中的可能作用。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂

    荧光素-荧光素酶试剂盒购自美国Promega公司；线粒体膜电位JC-1探针及钙黄绿素-氯化钴购自美国Sigma公司；DCFH-DA活性氧(reactive oxygen species,ROS)荧光探针购自上海碧云天公司；细胞计数试剂盒 (cell count kit-8,CCK-8)购自上海Dojindo公司；SIRT3单克隆抗体、3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)及辣根过氧化物酶标记的二抗购自美国ABclonal公司；A549细胞购自广州赛库生物公司。

    1.2 分组及处理

    将A549细胞分为4组(n=6)：对照组为细胞仅接受0.1% DMSO处理7 h；模型组为细胞给予DMSO预处理 ......