曹媛媛，李桂成，邓加雄，李云峰，段智

    (湖南省郴州市第一人民医院重症医学科，郴州 423000)

    急性肺损伤(acute lung injury,ALI)是脓毒症的常见并发症，但因其缺乏有效的治疗手段，在临床上具有较高的病死率。研究证实，肺泡上皮线粒体损伤是ALI的重要发病机制，因此维护线粒体稳定可以显著改善ALI[1]。线粒体自噬是指细胞通过选择性自噬清除受损或功能紊乱的线粒体以维持正常线粒体质量或功能[2，3]的现象，该作用已在心血管、神经系统等方面的疾病中被证实[4-6]，但在肺泡上皮细胞损伤中的作用研究较为鲜见。在本研究中我们通过H2O2的氧化应激作用介导肺泡上皮损伤细胞模型，探讨虎杖苷是否通过上调线粒体自噬减轻肺泡上皮线粒体损伤，从而阐述线粒体自噬在ALI发病中的重要作用，为临床治疗ALI寻找可能靶点。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂

    荧光素-荧光素酶试剂盒购于美国Promega公司；膜电位JC-1探针及钙黄绿素-氯化钴购自美国Sigma公司；DCFH-DA活性氧(reactive oxygen species,ROS)荧光探针购自上海碧云天公司；细胞计数试剂盒 (cell count kit-8,CCK-8)购自上海Dojindo公司；线粒体膜蛋白[线粒体外膜转位酶(translocase of outer mitochondrial membrane 20,TOM20)和线粒体内膜转位酶(translocase of inner mitochondrial membrane 23,TIM23)]，及线粒体生成调节因子[线粒体转录因子(mitochondrial transcription factor A,mTFA)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor-gamma coactivator-1α, PGC-1α)]单克隆抗体、3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)及辣根过氧化物酶标记的二抗购自武汉ABclonal公司；mt-Keima-COX8慢病毒滴度液购于南京PPL公司；A549细胞购自广州赛库生物公司 ......