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编号:382799
大鼠急性低氧运动对心肌细胞瞬时外向钾电流的影响
http://www.100md.com 2021年5月27日 中华老年多器官疾病杂志 2021年第5期
失活,电流密度,1材料与方法,1试剂与溶液,2仪器,3建立大鼠低氧运动模型,4大鼠单个心室肌细胞分离,5干扰电流的排除,6膜片钳全细胞记录,7电流参数的设定11,8统计学处理,2结果,1急性低氧运动对大鼠心室肌细
     马山山,李佳鑫,陈雅婷,蔡钟奇,白婧,刘传斌,李泱*,曹雪滨

    (1承德医学院研究生院,河北 承德 067000;2解放军陆军第八十二集团军医院心肾内科,河北 保定 071000;3河北大学中医学院,河北 保定 071000;4解放军总医院第六医学中心心血管病医学部研究所,北京100048)

    随着高原地区经济和旅游业突飞猛进的发展,越来越多的平原人前往高原地区。西部高原也是我国国防的重中之重,而平原地区部队急进高原,尤其是在急进高原后进行强体力作业(抢险救灾、军训军演、爬山负重等)将引起机体尤其是心脏功能的损伤[1]。高原低氧环境对心脏功能的损伤导致心律失常事件增加已被广泛认知[2,3]。急性运动后心率变异性增高,机体氧化应激水平明显升高,导致心功能降低,心律失常时间增加[4]。但急进高原低氧与强体力作业复合应激刺激对心脏功能的影响研究较少,相关机制尚不清楚。

    众所周知,心律失常的基础是心肌细胞电生理改变,急性缺氧和力竭运动均可改变心脏电生理,诱发心律失常[5,6]。瞬时外向钾电流(transient outward potassium current,Ito)是心肌细胞复极化电流的一个重要成分,它主要参与了动作电位复极化的1 期和2期,其改变可引起复极异常,诱发心律失常[7]。虽然已有低氧状态下Ito电流改变的研究,但目前尚未发现力竭运动是否也影响Ito,尤其是急性低氧和力竭运动复合应激源刺激对Ito电流影响尚未见报道。本研究利用低压氧舱联合转轮力竭运动制备大鼠应激模型,利用膜片钳技术记录单个心房肌细胞Ito的变化,进一步探讨其电流变化的门控机制,探究急进高原后进行强体力作业诱发心律失常的可能细胞电生理机制。

    1 材料与方法

    1.1 试剂与溶液

    胶原酶Ⅱ、胰蛋白酶、牛血清白蛋白、天门冬氨酸钾、丙酮酸钠、三磷酸腺苷镁(magnesium adenosine triphosphate,MgATP)、4-羟乙基哌嗪乙磺酸[4-(2-hydroxyerhyl)piperazine-1-erhanesulfonic acid,HEPEs]、CaCl2、CdCl2、BaCl2、4-氨基吡啶(4-aminopyridine,4-AP)、河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)、乙二醇醚二胺四乙酸(ethylene glycol ether diamine tetraacetic acid,EGTA)、多非利特均为美国希格玛公司产品;其他试剂均为分析纯。

    台氏液(Tyrode′s solution ......

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