焦阳，王继航，李影，沈建，侯小玲，沈明志，付振虹*

    (1解放军医学院，北京 100853；2中国人民解放军总医院第六医学中心心血管病医学部，北京 100853；3中国人民解放军总医院海南医院心血管内科，海南 三亚 572013)

    《中国心血管病报告2020》显示我国心血管病人数3.3亿，死亡率居首位，其中冠心病(coronary heart disease, CHD)患者1 139万人。虽然药物和介入手术治疗降低了心肌梗死(myocardial infarction, MI)相关死亡的发生率，但由于心肌细胞不可再生，急性缺血造成的不可逆心肌细胞凋亡和梗死灶的形成，成为急性心肌梗死(acute myocardial infarction, AMI)预后不佳的重要因素[1]。糖尿病(diabetes mellitus, DM)是CHD的独立危险因素，心肌梗死后28 d的死亡率是非糖尿病患者的2倍[2]。线粒体损伤是MI后心肌受损的关键信号机制，受损的线粒体通过自噬途径被清除，进而维持线粒体质量和数量的稳定[3]。DM患者心肌梗死后线粒体自噬作用减弱，线粒体结构和功能受损严重，加重心肌细胞凋亡。褪黑素(melatonin, Mel)是一种有效的抗氧化剂，对包括糖尿病、感染性疾病、代谢综合征等多种疾病均有益处[4]。Mel能有效减轻线粒体功能障碍，抑制心肌梗死后心肌细胞的损伤。然而，Mel是否通过增强线粒体自噬而发挥MI后心肌保护作用，其具体机制还有待进一步明确，特别是在合并DM的AMI中的作用，还未见确切报道。本研究通过构建小鼠糖尿病急性心肌梗死和细胞高糖高脂缺氧模型，观察Mel通过增强线粒体自噬减少心肌细胞损伤，从而改善心脏功能的潜在机制，旨在为合并DM的AMI患者提供新的临床治疗靶点提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    褪黑素、链脲佐菌素(streptozocin, STZ)(默克公司, 美国)；异氟烷(北京阳光英锐生物有限公司)；棕榈酸(北京金鑫博达生物技术中心)；一抗：B细胞淋巴瘤-2蛋白(B-cell lymphoma-2, Bcl-2)抗体、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase, Caspase-3)抗体、Bcl-2关联X蛋白(Bcl2-associated X, Bax)抗体和微管相关蛋白1轻链3-β(microtubules associated protein 1 light chain3-β, LC3)抗体、死骨片蛋白1(sequestosome 1, SQSTM1/P62)抗体、帕金蛋白(Parkin)抗体 ......