俞悦,张宇,陈雨婷,倪心冉,赵卫红

    (南京医科大学第一附属医院老年肾科,南京 210029)

    衰老会引起各器官功能减退,导致衰老相关疾病的发生发展。肾脏是最容易衰老的器官之一[1],探究肾脏衰老的发生机制,对延缓肾脏衰老相关疾病的发生并寻找可能的治疗靶点有重要意义。研究表明,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+)水平随年龄的增长而下降,烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)作为NAD+补救合成途径的重要前体,具有抗炎、抗氧化、减少DNA损伤、恢复线粒体功能等作用,可延缓年龄相关的器官功能衰退[2]。然而,NMN在肾脏衰老中的作用机制尚不明确。因此,本研究采用D-半乳糖(D-galactose,D-gal)诱导小鼠肾脏衰老模型,初步探究NMN对D-gal诱导肾脏衰老的作用及可能的机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物和主要材料

    24只SPF级雄性C57BL/6小鼠,6～8周龄,由南京医科大学动物研究中心提供。饲养于温度(22.0℃±2.0℃)、相对湿度(45%～55%)、特定光照周期(光照/黑暗:12h/12h)的通风环境中,所有实验小鼠均可自由饮水进食。本研究中所有动物实验相关操作均获得南京医科大学动物福利和伦理管理委员会批准。

    D-gal、NMN(Sigma,美国);p16抗体(CST,美国);p21、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)抗体(Proteintech,中国);β-肌动蛋白(β-actin)抗体(Servicebio,中国);衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-related β-galactosidase,SA-β-gal)染色试剂盒、聚氰基丙烯酸正丁酯(bicinchoninic acid,BCA)蛋白测定试剂盒(碧云天,中国) ......