黄丽丹,王博

    (武汉大学人民医院:1麻醉科,2胸外科,武汉 430060)

    急性肺损伤是一种常见的危重症,病死率极高[1]。临床上,急性肺损伤患者主要表现为呼吸急促、紫绀、肺顺应性降低及肺水肿,病理特征主要以大量炎症细胞浸润,肺泡上皮和血管内皮屏障损伤为主[2]。根据病理进展,急性肺损伤被分为4个时期,包括早期渗出期、晚期渗出或增殖期、扁平上皮化生期以及晚期增殖期[3]。引起急性肺损伤常见原因包括肺炎、肺栓塞以及肺移植后缺血再灌注或肺叶切除,间接原因为脓毒血症和创伤[4]。目前临床针对急性肺损伤的治疗除对症支持外,尚无特殊治疗及预防手段[5]。此外,不同病因所致的急性肺损伤,分子作用机制也有所差异。因此,进一步加深对不同病因所致急性肺损伤发病机制的认识,解析其发生发展过程中的关键靶点,对急性肺损伤的干预具有重要意义。

    人卵泡抑素样蛋白3(follistatin-like protein 3,FSTL3)是Hayette等[6]于1998年在慢性淋巴细胞白血病患者B细胞中发现的一种新型分泌蛋白。近年来,越来越多的研究发现FSTL3参与调节多种生物过程,包括细胞分化、衰老、炎症、氧化应激、代谢、免疫、动脉硬化和肿瘤进展[7-9]。有研究发现,FSTL3可通过诱导脂质沉积和巨噬细胞炎症反应加速动脉粥样硬化发生发展[10]。此外,FSTL3在超重或肥胖个体的脂肪组织中高表达,并与机体炎症反应呈正相关[11]。哮喘患者支气管上皮细胞中FSTL3的低表达水平与肺成纤维细胞的活力降低存在显著相关性[12]。上述研究均提示,FSTL3在炎症疾病中发挥重要作用,但FSTL3在急性肺损伤中的表达及作用目前尚未有研究报道。本研究通过构建脓毒血症肺损伤及肺缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)损伤两种急性肺损伤模型,观察FSTL3在肺损伤发生发展过程中的表达,同时使用FSTL3中和抗体(follistatin-like protein 3-neutra-lizing antibody,FSTL3-NA)或FSTL3基因敲除小鼠评估FSTL3抑制对急性肺损伤的影响。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)纯度为97.53%,购自上海源叶生物科技有限公司;肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、FSTL3、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)1、SOD2、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, GAPDH),均购自美国Abcam公司;FSTL3中和抗体(follistatin-like 3-neutralizing antibody,FSTL3-NA),购自北京热景生物技术有限公司 ......