胸腺肽α1对衰老小鼠肌肉减少症的调控机制
肌管,成肌细胞,1材料与方法,1研究材料,2方法,3统计学处理,2结果,1胸腺肽α1对小鼠成肌细胞C2C12增殖活性的影响,2胸腺肽α1通过激活自噬活性抑制性信号SQSTM1,p62对小鼠成肌细胞肌管形成的影响,3胸腺
亚森江·买买提,买买提吐尔洪·吐尔逊,苏婷,穆克达斯·阿布力提甫,祖力菲亚·阿吉木,徐红(新疆维吾尔自治区人民医院老年医学中心,乌鲁木齐830001)
肌少症是一种以运动能力降低和肌肉量减少为特征的疾病,该病可增加人们致残和致死的风险[1,2]。已知肌肉纤维在40岁后加速流失,到80岁时,肌肉将减少近30%,且难以有效治疗,严重影响患者的生活质量[3]。因此,亟待深入研究有效治疗肌少症的药物。胸腺肽α1是一种从小牛胸腺中分离出来高度保守的小肽段[4],在不同的生理和病理条件下(如感染、癌症、免疫缺陷、衰老),胸腺肽α1具有恢复体内平衡的特殊能力,根据宿主的炎症或免疫功能障碍状态,胸腺肽α1作为多任务蛋白发挥作用[5,6]。然而,胸腺肽α1对衰老导致的肌少症的作用并不清楚。本研究在地塞米松诱导的成肌细胞肌管直径减少模型和快速衰老型小鼠(SAMP8小鼠)中探讨胸腺肽α1对肌肉生成和肌肉萎缩的治疗作用,报道如下。
1 材料与方法
1.1 研究材料
小鼠成肌细胞(C2C12)购于武汉普诺赛生物科技有限公司;地塞米松(dexamethasone, DEX)和胸腺肽α1购于美国Sigma公司;杜氏改良培养基(Dulbecco′s modified eagle medium, DMEM)和10%胎牛血清购于美国Gibco公司;30只无特定病原级别(specified pathogen free, SPF)的雄性SAMP8小鼠(28.20±1.80)g购于北京华阜康生物科技股份有限公司;Lipofectamine 2000购于美国Invitrogen公司;小干扰RNA针对沉默p62的重组载体(p62沉默载体)购于上海吉玛公司;细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8, CCK-8)购于上海碧云天生物科技有限公司;SQSTM1/p62的第一抗体购于英国Abcam公司;肌球蛋白原D(myosinogen D, MyoD)、肌原细胞转录因子(myogenin, MyoG)、肌球蛋白重链(myosin heavy chain, MyHC)、肌肉RING-指蛋白1(muscle ring-finger protein 1, MuRF1)、肌肉萎缩相关蛋白(muscle atrophy related protein, MAFbx)的第一抗体均购于英国Abcam公司,所有对应的第二抗体均购于英国Abcam公司;TRIzol试剂购于美国Invitrogen公司;聚偏二氟乙烯膜购于美国Millipore公司 ......
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