沈建,张昕,焦阳,宿永康,李影,周伯宁,沈明志,付振虹*

    (1解放军医学院,北京 100853; 2通州离职干部休养所门诊部,北京 101149;3中国人民解放军总医院海南医院心血管内科,海南 三亚 572013)

    《中国心血管疾病与健康报告2022》显示我国冠心病患者1139万[1]。急性心肌梗死预后不佳,早期介入及溶栓等再灌注治疗可明显提升生存率,但心肌梗死后远期心血管事件高发[2]。急性心肌梗死后心肌细胞严重缺血、缺氧,能量代谢障碍,线粒体质量控制系统破坏,加重心肌损伤[3,4]。沙库巴曲缬沙坦(sacubitril/valsartan,S/V)是首个血管紧张素受体脑啡肽酶抑制剂,研究显示其在细胞及动物水平可能通过抑制炎症反应,减轻线粒体损伤,抑制纤维化等途径发挥心脏保护作用[5,6],但其对心肌细胞直接保护作用和早期应用后对线粒体动力学系统调控作用未有报道。本研究通过构建H9c2心肌细胞糖氧剥夺模型,探究S/V调节线粒体动力系统减少心肌细胞损伤的潜在机制,旨在为急性心肌梗死早期药物保护策略提供新的依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    S/V购自MCE公司;活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒购自碧云天公司;Annexin V/PI双染细胞凋亡试剂盒,线粒体膜电位检测试剂盒购自贝博公司;B细胞淋巴瘤-2蛋白(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)抗体、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase-3)抗体、Bcl-2关联X蛋白(Bcl2-associated X,Bax)抗体、线粒体融合蛋白1(mitofusin 1,Mfn1)抗体、线粒体融合蛋白2(mitofusin 2,Mfn2)抗体、动力相关蛋白 1(dynamin-related protein 1,Drp1)抗体、线粒体分裂蛋白1(fission 1,Fis1)抗体、细胞色素C(cytochrome C,CytC)抗体和二抗购自武汉三鹰技术有限公司 ......