细胞因子诱导人脐血间充质干细胞分化过程中细胞巢蛋白、神经丝亚单位和端粒酶逆转录酶mRNA的表达
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关键词 EGP；bPGP；脐血；间充质干细胞；端粒酶逆转录酶；巢蛋白；神经丝亚单位
中图分类号 R331
摘要 目的：观察细胞因子ECF和bPCF联合诱导人脐血间充质干细胞(MSCs)向神经细胞分化过程中细胞巢蛋白(ncstin)、神经丝亚单位M(NF-M)和端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的变化。方法：采集健康自然分娩产妇脐血，密度梯度离心分离单个核细胞(MNCs)，PBS洗涤2次后重悬于含体积分数20%胎牛血清的DMEM/P12巾，接种于T—75培养瓶内(细胞密度为1 x100ml-1)，一组加入细胞因子EGF和bFGF，终浓度各为10μg/L，另一组不加细胞因子，剩余细胞用液氮冻存。培养24 h倾去全部液体以除去未贴壁细胞，以后每3 d全量换液1次，倒置显微镜下观察细胞形态。分别收集培养1 d、4 d、7 d、14 d贴壁细胞和冻存细胞，采用RT—PCR方法检测nestin、 NF-M、hTERTmRNA的表达。 结果：未培养的脐血MNCs(内含MSCs)netin、NF，M、hTERT mRNA均表达阳性。培养后nestin、hTERT mRNA表达下降，至第7 d已不能检出；而NF—M mRNA的表达随培养时间延长而增强。与对照组相比，组胞因子组NF-MmRNA表达较高，nestin、hTERTmRNA表达的下降趋势延迟。结论：细胞因子 EGF和bFGF在联合诱导脐血MSCs分化为神经细胞的过程中，能下调hTERT mRNA的表达。
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