野生型ＤＮＡ聚合酶　β重组绿色荧光蛋白表达载体的构建

http://www.100md.com 2005年8月1日 赵国强 秦 冰 何 炜 赵 军 路 静 宋 谦 崔自由 董子

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     关键词 DNA聚合酶β；增强型绿色荧光蛋白；DNA序列分析

    中图分类号 Q786

    摘要 目的：构建携带野生型DNA聚合酶β基因(wtDNA Polβ)的重组真核绿色荧光蛋白表达载体pcCPP— C3-Polβ。方法：运用PCR方法，从质粒pcDNA3.1-polβ中扩增出wtDNA polβ的开放阅读框序列，T—A克隆至 pCEM-T载体，再定向克隆至pEGFP-C3，重组质粒PECPP—C3—polβ用限制性内切酶酶切鉴定，通用鉴定引物PCR扩增鉴定，并进行DNA序列分析。结果与结论：多种鉴定方法证实了重组载体PECPP—C3—polβ中的wtDNA polβ序列与CenBank中已知的序列相符。携带wtDNA Polβ的重组增强型绿色荧光蛋白表达载体pRGPP-C3—polβ构建成功。

    http://www.100md.com/html/paper/1671-6825/2005/04/05.htm

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