人骨形态发生蛋白－2真核表达质粒的制备、转染及表达
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[摘要]目的 制备含人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)基因的真核表达质粒，获得可稳定高效表达BMP-2的兔骨髓基质细胞，为进一步研究BMP-2在骨牵张区的成骨作用作准备。方法 制备携带有hBMP-2的全长真核表达质粒pcDNA3.1-BMP2。通过脂质体法将所得到的重组真核质粒转染到兔骨髓基质细胞中，用G418进行梯度筛选，从而得到能够稳定表达hBMP-2的细胞克隆。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测骨髓基质细胞(MSCs)hBMP-2mRNA的表达。结果 重组质粒通过EcoRI酶切后，电泳图示约1.5kb的hBMp-2的目的片段及5.5kb的载体片段，经测序显示核苷酸序列正确无误。经RT-PCR检测hBMP-2在转录水平mRNA的表达情况，提示转染组hBMP-2的mRNA量较空白对照组明显增加。结论 成功制备了含hBMP-2基因的真核表达质粒，转染后获得了高效表达hBMP-2的兔骨髓基质细胞。
[关键词]骨形态发生蛋白-2；真核表达质粒；骨髓基质细胞；基因转染
[中图分类号]R782.2
[文献标识码]A
[文章编号]1671-7562(2005)95-0302-04
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