磁珠捕获技术在定量液相杂交中的应用

http://www.100md.com 2003年8月1日 王卉放 许化溪 王胜军 杨 敏 夏 圣 李良菊 邵启祥 许文

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     [摘 要] 目的：在建立新的微生物DNA液相定量杂交法的基础上，检测了10株临床分离菌间染色体DNA的杂交率并与固相板法进行比较，为该法的推广应用奠定了基础。方法：根据SYBRGreenl能够特异性结合双股DNA的特性，借助链霉亲和素包被磁珠的分离技术和偏振荧光探测方法的敏感性，分别捕获和检测游离于杂交液中两种DNA形成的杂交体，计算两者间的同源性。结果：本法测得的5株肠杆菌科标准菌株和临床分离株种间或科/属间的杂交率与发表值一致。提示该法可用于各种细菌间的同源性测定，且结果稳定、可靠。结论：偏振荧光法定量测定细菌染色体的同源性，具有简便、快速、敏感、特异等优点，可以避免微孔板定量杂交法中因DNA脱板所造成的误差，便于临床推广应用。

    [关键词] 磁珠；偏振荧光；液相杂交；细菌染色体

    [中图分类号] R-33

    [文献标识码] A

    [文章编号] 1671—7783(2003)04—0285—04

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