枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶的克隆和表达
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[摘 要] 目的：运用分子生物学手段获得葡萄糖脱氢酶基因，并表达该基因。方法：根据枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶基因序列设计引物，通过PCR获得该基因并与源序列进行比较分析，与表达载体p2T22b连接后转化至大肠杆菌.IMl09(DE3)进行表达.并在全自动生化分析仪上用速率法测定其活性。结果：克隆到的葡萄糖脱氢酶基因与源基因的同源性为99%，克隆到的C乙)H编码的氨基酸序列167位左右存在突变：EVI(GAAGTGATT)→AF(GCGTTT)，利用酶的初提液测定的葡萄糖脱氢酶活力为75 U/L，比活性为10 U/mg。结论：运用基因工程手段获得了葡萄糖脱氢酶基因，与表达载体连接后的重组体经大肠杆菌初步表达有活力，经诱导有望获得高产量的葡萄糖脱氢酶，从而为临床服务。[关键词] 枯草芽孢杆菌；葡萄糖脱氢酶；克隆；表达[中图分类号] R446.6
[文献标识码] A
[文章编号] 1671—7783(2004)01—0007—04
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