常规HE染色质量控制
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摘要:病理切片染色质量控制是一个多环节、多步骤的过程。组织离体后从取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色全过程,其中某一环节出现问题均会影响切片的质量,而苏木素、伊红染色在切片过程中是关键的一个环节,首先,要配制好试剂,苏木素要变成真正的染料,氧化是关键的一步。苏木素在氧化过程中,氧化剂量的控制对苏木素是非常关键[3],氧化不足或未经过氧化的苏木素染色能力差,氧化过度,表面一层氧化膜,易引起切片污染和操作不便。苏木素染液的配制在加入冰醋酸要适量,适量的加入抑制了苏木素对胞浆的着色力,加多了会影响细胞核着色,加少了引起核浆共染。同时,在日常工作中把工作制度化,加强学习,现代病理技术已经不是单纯的大体标本和普通的HE染色切片制作,而是多学科相互渗透,相互影响,综合性理论、技术性都很强的学科技术。
关键词:HE染色质量控制
【中图分类号】R9【文献标识码】B【文章编号】1671-8801(2013)03-0284-01
苏木精和伊红染色方法,简称HE染色方法,是生物学和医学的细胞和组织学最广泛用的染色方法。HE染色是石蜡切片最基本的染色方法,优质的HE染色仍是临床病理诊断最可靠的依据。组织制片过程中,组织需经过取材、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片后,HE染色多种环节技术操作,制作一张优质的HE染色切片,是每个病理实验技术人员必须掌握的一项基本技能。
1材料与方法
1.1材料。组织块10%中性福尔马林(Na2HPO46.5g,NaH2PO44g,40%甲醛10ml,加水至1000ml调至7.0PH)无水乙醇、95%乙醇、80乙醇、丙酮、二甲苯、石蜡、苏木素染液、1%盐酸酒精、伊红染液等。
1.2方法。
常规组织处理。①标本接受时,认真核对申请单与送检单是否一致,符合要求方可接受[1],让送检人及接受人签字;②固定:标本离体后要及时固定(30min内),10%中性福尔马林,固定液量为组织块4-5倍,可达15-20倍,大块组织固定时间24小时(或以上),小块组织4-6小时;需把标本全浸在固定液中。在取材时标本固定不及时或者固定前组织已经干枯,经过切片染色后,在干枯区域内出现成片的灰染现象,组织结构模糊不清,细胞呈条索状,排列密集,这种组织细胞由于干枯引起染色呈灰染,是无法补救的,因此一定要及时固定标本。③取材:大小以(1.5×1.1×0.2-0.3cm)为宜,过厚过大组织,脱水不易干净,透明影响大,组织块会发白,切片不完整,染色时容易脱片,内镜及各种穿刺组织一般较小,要用易透明的薄纸包好,最好标本染上伊红液,以免包埋过程中遗失。组织取太薄 ......
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