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编号:996770
马钱苷对AGEs致巨噬细胞极化的影响
http://www.100md.com 2020年2月17日 南京中医药大学学报 2020年第1期
孵育,批号,1材料,1细胞与试剂,2仪器,2方法,1AGEs的制备,2细胞培养,3流式细胞仪检测巨噬细胞极化标记蛋白表达百分率,4免疫荧光法检测巨噬细胞极化标记蛋白iNOS,CD206的表达,5ELISA法检测巨噬细胞上清
     甘啸阳,王威,吕杨,陈玉萍,卢金福,吕高虹,刘成鼎,许惠琴

    (1.南京中医药大学药学院,江苏 南京 210023;2.江苏省中药药效与安全评价重点实验室,江苏 南京 210023;3.南京大学金陵学院,江苏 南京 210023;4.江苏医药职业学院基础医学部,江苏 盐城 224005;5.重庆市垫江县中医院药学部,重庆 408300)

    随着全球范围内糖尿病患者人数增加,糖尿病并发症的危害也逐渐被人们所认知,研究发现慢性炎症是众多糖尿病并发症发病的重要原因[1]。高血糖条件下,葡萄糖与蛋白质反应生成晚期糖基化终末产物(Advanced glycation end products,AGEs),参与炎症反应[2]。巨噬细胞是一种广泛存在的免疫细胞,在炎症反应的各个阶段中都起着重要作用[3]。现代研究认为,巨噬细胞主要通过2种极化分型参与炎症[4]:介导损伤、促进炎性因子分泌的M1型和抑制炎症、促进组织修复与重建的M2型,2者比例变化与动态平衡调控着炎症的发生与进展。

    山茱萸始载于《神农本草经》,具有补益肝肾,涩精固脱的功效。马钱苷是山茱萸主要效应成分,具有较好的预防炎症应激的作用[5],能够下调糖尿病小鼠炎性因子IL-6和TNF-α的分泌[6],减少ET-1、MCP-1、VCAM-1分泌,升高NO水平,对HUVEC损伤具有明显的保护作用[7]。但目前马钱苷对巨噬细胞炎症的干预还未见报道。因此本实验通过AGEs刺激巨噬细胞,观察和探讨马钱苷对AGEs致巨噬细胞炎症损伤的干预作用,为马钱苷治疗糖尿病慢性炎症提供实验依据。

    1 材料

    1.1 细胞与试剂

    小鼠巨噬细胞RAW264.7由南京中医药大学中药药理学实验室提供。马钱苷标准品(HPLC≥98%),成都瑞芬思生物科技有限公司,批号:M-010-160516;氨基胍,Sigma公司,批号:079K1734V;IL-10、IL-12、TNF-α ELISA试剂盒 ......

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