张涛,宋世震,刘睿

    (1.武汉科技大学医学院，湖北 武汉 430065；2.江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室，江苏 南京 210023；3.江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心，江苏 南京 210023；4.南京中医药大学药学院，江苏 南京 210023)

    黄明胶CollaCoriiBovis为牛科动物黄牛BosTaurusdomesticus的皮经加工熬制而成的胶。黄明胶味甘，性平，主入肺、大肠经。具有滋阴润燥、养血止血的功效[1]。黄明胶一词，首见于《食疗本草》，可“敷肿，治咳嗽不差，止吐血、咯血”。《本草纲目》记载黄明胶“治吐血、衄血、下血、血淋，下痢，妊妇胎动血下，风湿走注疼痛，打扑损伤，汤火灼疮，一切痈疽肿毒，活血止痛，润燥，利大小肠”[2]。

    近年来，以电泳法、HPLC法、全自动氨基酸分析法对黄明胶中主要的蛋白质类、肽类、氨基酸类、无机元素等成分进行了较为系统的研究[3-4]；基于LC-QQQ MS分析特征性肽段的方法，被用来鉴别或辅助鉴别胶类药材的真伪[5-7]，这些工作为黄明胶的物质基础研究提供了前期研究思路。为此，本文采用基于shutgun技术的蛋白质组学研究思路与方法对黄明胶中蛋白质、肽类成分开展全面分析与鉴别，为黄明胶的物质基础研究奠定了工作基础，也为阿胶、鹿角胶、龟甲胶等胶类药材功效物质基础研究提供借鉴。

    1 材料

    戴安U3000 NanoRSLC纳升液相系统(美国DIONEX公司)；Thermo Q Exactive Orbitrap质谱仪(美国Thermo Fisher公司)；BP 211D电子天平(德国Sartorius公司)；Rotavapor R-210旋转蒸发仪(瑞士BUCHI公司)；离心浓缩仪(美国Labconco公司)；Freezone 4.5 plus冷冻干燥机(美国Labconco公司)。

    碳酸氢铵，胰蛋白酶(Promega质谱测序级)，乙腈、甲醇、甲酸等质谱用试剂均为质谱级(德国Merck公司)。Seppack C18固相萃取小柱(Waters公司)；多肽测定试剂盒(美国Thermo公司)。黄明胶(批号：170510，170515，购于安徽亳州药材市场) ......