莫子晴，蔡皓，段煜，裴科，张雅婷，钮敏洁，王梦晴，于慧

    (1.南京中医药大学药学院，国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心，江苏 南京 210023；2.山西中医药大学制药与食品工程学院，山西 太原 030024)

    抑郁症是目前全球发病率高居首位的精神类疾病，其特征是快感低下、情绪低落以及自杀率高。据保守估计，全球抑郁症患者至少已经有3.5亿[1]。四逆散最早记载于张仲景所著《伤寒论》，由柴胡、白芍、枳实、炙甘草4味药组成，具有疏肝解郁、和解表里之功效，为具有调节情志作用的经典名方，同时也是中医临床治疗抑郁的基础方。醋是中药炮制的一种重要辅料，具有引药入经、破血快、散瘀消肿的作用，被广泛应用于疏肝解郁、散瘀止痛药物的炮制。《本草蒙筌》有“用醋注肝经且资住痛”的记载[2]。柴胡和白芍醋炙后，均能增强其疏肝解郁的作用[3-4]。课题组前期研究发现，柴胡和白芍作为四逆散的君药和臣药，醋炙后组方的四逆散在抗抑郁的作用方面得到了显著提升。课题组前期还采用了UHPLC-Q-TOF/MS技术对四逆散及柴胡和白芍醋炙后组方的四逆散的化学成分进行了分析比较，并结合多元数据分析手段筛选出了12种成分为四逆散醋炙增效的潜在物质基础[3]。然而，四逆散对于抑郁症的治疗机制以及炮制增效的科学内涵仍有待进一步的深入研究。

    粪便代谢物为肠道菌和宿主的共同代谢物，是能整体反映疾病条件下代谢状况的重要研究对象[5]。本课题组开展的该项研究具有双重的目的。首先，我们建立一种广泛使用的慢性不可预知温和应激(CUMS)抑郁模型，探索抑郁大鼠粪便代谢组学的变化，对前人的研究进行验证和补充。其次，我们运用1H-NMR技术从代谢角度探讨柴胡和白芍醋炙前后的组方对四逆散抗抑郁作用的影响，从粪便代谢组学的角度探究中药复方炮制增效内涵的研究报道，可为进一步深入研究抑郁症、中药炮制、肠道菌群三者的关联奠定基础。

    1 材料

    1.1 实验动物

    雄性SD大鼠40只，SPF级，体质量200～250 g，购自上海杰思捷实验动物有限公司，许可证号：SCXK(沪)2018-0004。本实验经南京中医药大学动物伦理委员会批准，批准号：ACU190801。

    1.2 药物与试剂

    四逆散由柴胡、白芍、枳实和炙甘草4味饮片按1∶1∶1∶1的比例组成。柴胡饮片(批号：20180601)、白芍饮片(批号：20180611)、枳实饮片(批号：20190129)和炙甘草饮片(批号：20180713)均购自安徽铜陵禾田中药饮片有限公司,每味饮片经南京中医药大学刘训红教授鉴定为正品 ......