李娟,张中乐,吴嘉珍,沈红艺

    (1.上海中医药大学公共健康学院，上海 201203；2.上海市第一人民医院嘉定分院,上海 201203)

    非酒精性脂肪肝病(NAFLD)是指在没有大量饮酒或其他继发性脂肪肝原因下出现肝脂肪变性[1]，其特征是肝脏脂肪积累的增加，涵盖了非酒精性单纯性脂肪肝(NAFL)、非酒精性脂肪肝炎(NASH)及其相关肝硬化、肝衰竭或肝癌[2]。NAFLD的发病率随肥胖的增加而增加，肝脏游离脂肪酸(FFA)的增加是NAFLD发病机制的核心[3]。

    沉默信息调节因子1(SIRT1)是Sirtuins家族的一员，研究表明SIRT1可以抑制脂肪从头合成相关的转录因子碳水化合物应答元件结合蛋白(ChREBP)、胆固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)的表达；脂肪酸合成酶(FAS)是SREBP-1c的下游靶标，也是FFA合成的关键酶，当SREBP-1c被SIRT1抑制后，FAS的表达也会下降，从而减少新生脂肪的合成[4-6]。黄芩苷(BA)是从黄芩干燥根中提取的黄酮类化合物，现代药理学研究表明黄芩苷具有调节血脂、抗炎、抗氧化、免疫调节等作用[7-9]。本实验通过体外诱导肝脏脂肪沉积模型，探讨黄芩苷对肝脏脂肪沉积以及SIRT1相关因子表达的影响。

    1 材料和方法

    1.1 细胞、药物和试剂

    HepG2细胞由中国科学院院上海生命科学研究院细胞库提供；黄芩苷(wkq18013013)购自四川维克奇生物科技有限公司(纯度大于98%)；胎牛血清(FBS)、高糖型DMEM、胰酶、PBS购自Gibco公司；DMSO、油酸(OA)、棕榈酸(PA)、油红O购自Sigma公司；双抗(青链霉素)购自HyClone公司；细胞培养板、冻存管购自Corning公司；CCK-8试剂盒购自东仁化学科技(上海)有限公司；甘油三酯(TG)测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所；IL-6、TNF-α酶联免疫分析试剂盒购自武汉贝莱茵生物科技有限公司；SIRT1(ab110304)、SREBP-1c(ab3259)、ChREBP(ab92809)和FAS(ab133619)抗体购自Abcam公司；β-action(NM_001101)抗体购自上海拓然生物科技有限公司；山羊抗兔(ARG65351)、山羊抗鼠(ARG65350)IgG购自Arigo公司 ......