秦子飞,王培乐,邢晗,韩立,卞华,杨晶,张晓坚

    (1.郑州大学第一附属医院,河南 郑州 450052;2.河南省张仲景方药与免疫调节重点实验室,河南 南阳 473004;3.河南省精准临床药学重点实验室,河南 郑州 450052)

    CYP1A1是一种重要的细胞色素P450酶,主要分布于肝脏、肠道等器官[1]。它可以通过结构中血红素的铁离子传递电子,氧化多环芳烃类物质、黄曲霉毒素等致癌物,在致癌物的活化和解毒过程中起着重要的作用[2]。此外,雌激素经CYP1A1氧化形成非致癌性的2-羟基雌激素,经CYP1B1催化生成致癌性的4-羟基雌激素。雌激素的氧化代谢产物具有DNA损伤效应,与多种肿瘤的发生有关,高4-羟基雌激素/2-羟基雌激素比值已经成为判断肿瘤形成的重要标志[3]。因此,CYP1A1在外源物清除及内源物水平稳态等方面发挥着关键调控作用。

    补骨脂是我国常用传统中药,具有补肾壮阳、补脾健胃之功效,临床上常用于治疗骨质疏松、骨折等疾病[4-7]。香豆素、异戊烯基成分等是补骨脂的主要成分,也可能是其发挥药效的活性成分[8]。已有研究表明补骨脂所含的香豆素Bakuchicin(补骨脂素和异补骨脂素的结构类似物)能显著抑制CYP1A的活性,对CYP1A1和CYP1A2均表现出竞争性抑制作用,抑制常数Ki值分别为0.11、0.32 μmol·L-1[9]。此外,补骨脂富含的异戊烯基黄酮类成分的结构类似物6-Prenylnaringenin,可以通过作用于CYP1A1和CYP1B1,调节雌激素的羟基化代谢,进而起到植物雌激素样作用[10]。补骨脂富含的成分可能通过药物-药物相互作用或改变内源物代谢影响机体的生理状态。

    目前,关于补骨脂富含的异戊烯基成分对CYP1A1的抑制活性评价未见报道,这也增加了其可能出现不良反应的风险。基于此目的,本实验将重点探讨补骨脂富含的异戊烯基成分对CYP1A1的抑制活性评价,并结合分子对接实验进行验证,以期发现补骨脂中具有抑制CYP1A1活性的小分子化合物,为临床解释补骨脂不良反应和合理使用提供科学依据。

    1 材料

    1.1 仪器

    超高效液相色谱串联三重四级杆质谱联用(UHPLC-TQD-MS)仪:色谱系统为Waters ACQUITY I-Class超高效液相色谱仪(包括二元梯度泵,自动进样器和柱温箱),质谱系统为Waters TQD三重四级杆质谱,配套Masslynx 4.1数据处理系统;BP211D精密电子天平购于北京赛多利斯仪器系统有限公司;MTC-100恒温振荡器购于杭州米欧仪器有限公司;QL-861涡旋仪购于海门市其林贝尔仪器制造有限公司;3K-15高速冷冻离心机购于德国Sigma公司 ......