孔俊虹,陈弦,沙晨曦,龚楚桥,宋晓龙

    (1.南京中医药大学附属常州市中医医院,江苏 常州 213003;2.盐城市中医院心内科,江苏 盐城 224001)

    冠心病即冠状动脉粥样硬化性心脏病,是由于冠状动脉粥样硬化引起的管腔狭窄或闭塞,导致心脏组织缺氧、缺血或坏死而引起的缺血性心脏病。抑郁症已被认为是冠心病一个重要的独立危险因素。越来越多的证据表明冠心病患者的抑郁症患病率非常高,在冠状动脉旁路移植术或心肌梗死后,重度抑郁症的发生率约为15%,外加较轻度的抑郁症,发病率超过了40%[1-2]。合并抑郁症会导致冠心病患者出现不良结局的风险增加,如较差的运动耐受性、较低的治疗依从性、较差的生活质量及认知能力下降等[3-7],死亡的相对风险也会增加。

    炎症在冠心病和抑郁症的病理学中起着关键作用，是冠心病的一个核心特征,在所有动脉粥样硬化阶段(从动脉粥样硬化斑块的起始到传播和激活,最终导致血栓形成)中都起着关键作用。研究表明，与健康受试者相比,冠心病患者表现出更高的炎症标志物及促炎基因表达[8-10]。促炎基因在抑郁症患者中表达显著增加[11-12]。GSK3β通过差异影响转录因子NF-κB亚基p65和CREB与共激活因子CREB结合蛋白(CBP)的相互作用来调节炎症反应[13-14]。研究表明,丹参酮ⅡA对GSK3β活性具有一定的抑制作用,其通过增加GSK3β的磷酸化,抑制了NF-κB的磷酸化,导致促炎因子IL-6和TNF-α表达降低,发挥了抗炎活性[15]。本研究构建了ApoE-/-小鼠冠心病合并抑郁模型,后给予丹参酮ⅡA,通过检测炎症相关蛋白的表达,探讨丹参酮ⅡA抗冠心病伴抑郁的可能机制。同时也为丹参酮ⅡA在心血管疾病中的应用提供数据支持。

    1 材料与方法

    1.1 动物

    36只雄性SPF级ApoE-/-小鼠,8周龄,体质量21～25 g,购自常州卡文斯实验动物有限公司,许可证号:SCXK(苏)2016-0010。实验过程经南京中医药大学伦理委员会批准,批准文号:201901A055。动物饲养于南京中医药大学实验动物中心,自由饮食和饮水,恒温(21.0±2.0)℃,恒湿(55.0±5.0)%,保持12 h光照和黑暗交替循环。

    1.2 主要试剂及仪器

    1.2.1 主要试剂 丹参酮ⅡA(上海麦克林生化科技有限公司,批号：S819421);高脂饲料(0.15%胆固醇+21%猪油+78.85%基础饲料);油红O染料(上海麦克林生化科技有限公司,批号：S817380);苏木素-伊红(HE)染液、BCA蛋白浓度测定试剂盒、RIPA强裂解液、磷酸酶抑制剂(碧云天生物技术公司,批号：C0105S、P0012S、P0013B、P1081);TC、TG含量检测试剂盒(北京索莱宝科技有限公司,批号：BC1980、BC0620);HDL-C、LDL-C、IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10 ELISA检测试剂盒(上海茁彩生物科技有限公司,批号：ZC38176、ZC38098、ZC-37974、ZC-37988、ZC-39024、ZC-37962);NF-κB、p-NF-κB、GSK3β、p-GSK3β(Ser9)、CREB、p-CREB(Ser133)单克隆抗体(CST公司,批号：8242S、3033S、9315S、9331S、9197S、9198S);GAPDH单克隆抗体、二抗、ECL发光液(Affinity公司,批号：AF7021、S0001、K002) ......