二至丸对绝经后骨质疏松模型大鼠脂肪组织糖代谢影响
批号,骨密度,1材料与方法,1动物,2药物与制备,3仪器与试剂,4模型制备及干预方法,5检测指标和方法,2结果,1大鼠一般状态比较,2给药前后各组大鼠体质量及内脏脂肪质量比较,3二至丸对大鼠骨密度的影响,4二至
韩龙,谭登,万仕炜,方彭华,黄桂成,闵文(南京中医药大学第一临床医学院,江苏 南京 210023)
绝经后骨质疏松症属中医“骨痿”范畴,最新《绝经后骨质疏松症(骨痿)中医药诊疗指南》概括其有3个基本证型,分别是脾肾阳虚证、肝肾阴虚证和肾虚血瘀证,且临床以肝肾阴虚型最为多见[1]。二至丸作为平补肝肾之阴的经典方剂,应用范围较广,临床疗效好[2]。近年来大量研究显示,二至丸能通过降低绝经后骨质疏松症骨组织中RANKL/OPG比率,抑制骨质流失,增强骨强度,促进骨重建,改善骨质疏松[3-6]。
骨组织代谢与脂肪组织代谢水平关系密切,脂肪组织分泌脂肪因子如瘦素、脂联素、趋化素等,调节骨稳态[7-8]。另外,体脂含量与骨量成负相关,脂肪组织代谢紊乱能通过激活NF-κB/RANKL炎症信号通路增强破骨细胞活性,加快骨吸收过程,从而引起机体骨量减少[9-10]。
前期研究表明,二至丸能够改善绝经后骨质疏松骨重建过程,而其对骨重建影响是否与脂肪组织糖代谢有关尚不清楚。因此,本研究探讨二至丸对绝经后骨质疏松大鼠脂肪组织糖代谢影响及机制。
1 材料与方法
1.1 动物
SPF级雌性SD大鼠56只,6~8月龄,体质量300~360 g,购自南京市江宁区青龙山动物繁殖场,动物许可证号:SCXK(苏)2017-0001。动物饲养于南京中医药大学动物实验中心,饲养温度20~22 ℃,自由进食、饮水。实验经南京中医药大学伦理委员会批准,批准号:201910A024。
1.2 药物与制备
取500 g女贞子(四川绵阳市,批号:18121111),将其粉碎成粗粉状,采用10倍量70%乙醇回流提取2次,每次1 h,合并2次提取液,减压浓缩回收乙醇,浓缩至500 mL(即生药1 g·mL-1),-20 ℃储藏备用。取500 g墨旱莲(安徽亳州,批号:190301),采用10倍量水回流提取2次,每次1 h,合并2次提取液,减压浓缩回收水,浓缩至500 mL(即生药1 g·mL-1),-20 ℃储藏备用。临用前取同体积女贞子、墨旱莲粗提液混合均匀,得二至丸粗提液。阿仑膦酸钠片(广东彼迪药业,批号:20180901),规格:每片10 mg,溶解浓度:0.2 g·L-1;氟化钠(罗恩试剂,批号:R015014),规格:25 g,溶解浓度:1 g·L-1。
1.3 仪器与试剂
小动物双能X线仪(MEDIX 90 ......
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