白荣钰,易欢,邱静文,陈丰连,王莹,陈冰莹,李瑜,张蕾

    (1.广州中医药大学中药学院,广东 广州 510006;2.广州中医药大学护理学院,广东 广州 510006)

    动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是脂质长期沉积于血管壁上形成的一种慢性疾病,是冠心病、脑梗死、心绞痛和缺血性中风等心脑血管疾病发生的主要原因[1]。AS发展因素有脂质浸润、血管内皮慢性炎症等,还伴随着宿主代谢物变化。近年来,代谢组学技术应用到心血管疾病上的研究较多,运用代谢组学技术可预测心血管疾病的发生发展,同时为研究药物的效应和作用机制提供了有效的方法。毛冬青为冬青科常绿灌木植物毛冬青IlexpubescensHook.et Arn的干燥根,具有清热解毒、活血通脉、消肿止痛的功效[2]。研究表明毛冬青中主要活性成分是三萜皂苷类[3]。但有实验证明[4],毛冬青三萜皂苷(Ilexpubescenstriterpenoid saponins,IPTS)的口服吸收利用度较低,少量成分入血,这与口服给药具有明显治疗冠心病的作用[5]产生了矛盾。笔者前期研究表明[6]IPTS能调节AS大鼠肠道菌群的结构与功能,这也许能解释其口服吸收利用度低但却具有明显抗AS作用的原因。同时肠道菌群也会参与宿主的代谢,因此本研究通过非靶向代谢组学分析IPTS干预后大鼠粪便和尿液代谢组的变化,以此来研究IPTS的作用机制。

    1 材料

    1.1 仪器

    SpectraMax iD5多功能酶标仪(美国Promega公司);JC-100A生化培养箱(上海和呈仪器制造有限公司);HM340E冷冻切片机(美国Thermo Fisher公司);SII-N14B恒温水浴箱(上海一恒科技有限公司);Bruker 600 MHz AVANCE Ⅲ NMR(德国Bruker公司);DH300涡旋混合器(杭州佑宁仪器有限公司);TDL-80-2B台式冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂)。

    1.2 药品与试剂

    毛冬青(批号:YPB010001)购自广州致信药业股份有限公司,经广州中医药大学张丹雁教授鉴定为冬青科冬青属植物毛冬青IlexpubescensHook.et Am.的干燥根;高脂饲料(由3%胆固醇,0.5%胆酸钠,0.2%丙基硫氧嘧啶,10%猪油,5%白糖,81.3%基础饲料组成)购自北京华阜康生物科技股份有限公司;维生素D3注射液(批号:20190401)购自哈尔滨市道外区宏达动物药品厂;总胆固醇(TC)试剂盒(批号:20190924)、甘油三酯(TG)试剂盒(批号:201909016)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)试剂盒(批号:20190905)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)试剂盒(批号:20190905)均购自南京建成生物工程研究所;磷酸氢二钾(K2HPO4)、磷酸二氢钠(NaH2PO4)均为分析纯,购自上海麦克林生化科技有限公司;重水[D2O,含0.05% 3-(三甲基甲硅基)氘代丙酸钠(TSP),w/v]购自美国Sigma公司 ......