凌晓颖,孙逊,李维峰，袁斌

    (南京中医药大学附属医院,江苏 南京 210029)

    呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)是全球婴幼儿、老年人和免疫功能低下人群病毒性肺炎最常见的病原体之一[1]。RSV在上呼吸道的上皮细胞中复制一段时间后,释放的病毒颗粒转移到下呼吸道的细支气管或肺泡,引起鼻塞、咳嗽、喘息,病情严重会出现呼吸窘迫、气道堵塞,甚至导致呼吸衰竭和死亡[2]。目前防治RSV感染的方式有限,尚无安全有效的抗病毒药物及批准用于临床的疫苗[3]。

    肺泡上皮屏障主要由肺泡上皮Ⅰ型细胞、Ⅱ型细胞及细胞间的紧密连接(Tight junction, TJ)组成,是进行气体交换、抵御病原体入侵的重要免疫屏障[4]。紧密连接由蛋白质和脂类组成,其中蛋白质占主要地位,包括跨膜蛋白[紧密连接蛋白(Claudin)、闭合蛋白(Occludin)]和闭锁小带蛋白(Zonula occludens,ZO)等[5]。RSV主要靶向气道和肺泡上皮细胞,上皮细胞损伤后,相邻细胞的裂隙增大,细菌和炎症因子进入肺组织,放大局部和全身炎症[6]。因此,修复肺上皮屏障可能是防治RSV的重要方向。

    RSV肺炎在中医古籍中虽无确切的病名记载, 但根据本病“喘、咳、痰、热”的四大症候特点，可将其归类于“肺胀”“马脾风”“肺家炎”等疾病范畴，急性期以痰热闭肺证最为多见[7]。全国名中医汪受传教授针对本病肺气郁闭的病机特点,在经方麻杏石甘汤基础上,加宣肺止咳之前胡,肃肺平喘之桑白皮,泻肺涤痰之葶苈子,解毒活血之虎杖等,组方制成以开肺化痰、解毒活血为主要功效的清肺口服液[8]。清肺口服液临床运用多年,能明显减轻RSV肺炎患儿咳嗽、发热等症状,疗效显著[9]。课题组前期研究发现,黄酮类成分是清肺口服液的主要效应物质,能够抑制RSV复制,减轻肺组织的炎症损伤[10]。最新网络药理学研究分析发现,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是清肺口服液黄酮类成分(Fla)治疗RSV肺炎的关键通路之一[11],p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)还被报道与RSV导致的上皮屏障损伤有关[12]。在RSV感染中,p38 MAPK的激活是由Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)信号通路介导的[13]。因此本研究建立RSV感染小鼠模型,观察药物对紧密连接蛋白、TLR4/MyD88/p38 MAPK通路的影响,探究Fla保护肺上皮屏障的作用机制,也为清肺口服液的推广应用提供理论依据 ......