赵梦,刘卓雅,于嘉敏,王芮, 范铭婕,乔宏志,3

    (1.南京中医药大学药学院,江苏 南京 210023;2.江苏省中药功效物质重点实验室,江苏 南京 210023;3.江苏省中药高效给药系统工程技术研究中心,江苏 南京 210023)

    吴茱萸碱(Evodiamine,EVO)是芸香科植物吴茱萸、石虎和疏毛吴茱萸的干燥近成熟果实中的主要生物碱成分,具有抗肿瘤、抗胃溃疡、抗炎、抗肥胖等多种药理活性[1],但存在水溶性差、生物利用度低等弊端。为了克服上述问题,研究人员制备了脂质体[2-4]、脂质纳米粒[5]等脂基新制剂,均显示出对EVO成药性的改善作用。

    近年来,从多种植物鲜榨汁中分离到一种以脂质双层为基本骨架,包含蛋白、核酸等活性成分的泡状纳米结构,被命名为细胞外囊泡样纳米粒(Extracellular vesicle-like nanoparticles,EVNs)[6]。EVNs保留了原植物的组成和活性功能,在肿瘤、肠炎、酒精肝、肺纤维化等疾病的治疗方面有明显疗效[7]。此外,从EVNs提取的脂质还可用于装载亲疏水小分子药物及核酸药物等[8-10],发挥载体作用。例如将6-姜烯酚载入生姜EVNs来源脂质后,可减缓释药速度,提高生物利用度,用于治疗结肠炎[11]。有报道显示EVNs来源的脂质还具有特定的转运趋向性,可以引导药物到达特定的部位。例如生姜EVNs脂质中含有的磷脂酸与EVNs在肠道的积累相关,磷脂酰胆碱促进EVNs从肠道向肝脏转移[12];用葡萄柚EVNs脂质制备的纳米粒能携带JSI-124靶向抑制肿瘤生长[9]。

    生姜是常见的药食同源中药，生姜来源的EVNs对结肠炎[13]、牙周炎[14]、酒精性肝损伤[15]等多种疾病有效。目前已有研究通过脂质谱学分析，证明生姜来源EVNs中含有多种脂质成分，例如磷脂酸(PA)、双半乳糖甘油二酯(DGDG)、单半乳糖甘油二酯(MGDG)、磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰肌醇(PI)等[16]。本文以生姜来源EVNs为对象，提取其脂质用于EVO的装载，将考察脂质提取条件、载EVO脂质体(EVO@Lipo)的工艺影响因素及体外释药行为，以期改善EVO成药性，考察生姜EVNs来源脂质的载释药性能。

    1 材料与方法

    1.1 仪器

    美的MJ-WJE2802D榨汁机(美的集团有限公司);Optima XP1超速离心机(美国Beckman Coulter公司);Regulus 8100扫描电子显微镜(日本日立公司);Eppendorf低温台式离心机(德国Eppendorf公司);NanoSight NS300纳米颗粒跟踪分析仪(英国Malvern公司);Zetasizer Nano-ZS90(英国 Malvern公司);BT 25S十万分之一天平、Waters E2695 HPLC(美国Waters公司);THZ-C恒温震荡箱(苏州培英公司);JY96-ⅡN超声波细胞粉碎机(宁波新芝生物科技股份有限公司);PB-10标准型pH计(德国Sartorius公司);DSC 214差示扫描量热仪(德国耐驰);红外分光光度计(美国Thermo公司);Milli-Q纯水系统(美国Millipore公司) ......