许伟辰,罗子宸,何钰,狄留庆,郭青,单进军

    (1.南京中医药大学中医儿科学研究所,江苏省儿童呼吸疾病(中医药)重点实验室，江苏 南京 210023;2.江苏省食品药品监督检验研究院，江苏 南京 210019;3.江苏省中药高效给药系统工程中心，江苏 南京 210023)

    桔梗是桔梗科植物桔梗Platycodongrandiflorum(Jacq.)A.DC的干燥根,性平,味苦、辛,归肺经,具有宣肺、利咽、祛痰和排脓的功效[1]。桔梗中化学成分以皂苷类为主,现代研究表明,桔梗中皂苷类成分具有多种药理作用,如桔梗皂苷D具有抗炎[2]、降脂[3]和保肝[4]作用;远志皂苷D与去芹糖桔梗皂苷D具有抗癌作用[5-6]等。目前《中国药典》2020年版规定桔梗按干燥品计算,桔梗皂苷D含量不得少于0.10%[1]，但单一以桔梗皂苷D为含量测定标准无法满足桔梗质量控制要求。桔梗分布广泛,南北皆有产出,主产于安徽、河南、河北和内蒙等地[7]。桔梗产地与其质量密切相关,现皆以南桔梗(即华东产区)为较优品种[8]。皂苷由于缺乏共轭体系,紫外吸收差,因此常使用蒸发光散射检测器(ELSD)进行含量测定[9]。Lu等[10]收集了11省(市)23个地区的桔梗样品,采用HPLC-ELSD法建立了桔梗指纹图谱,确定了19个共有峰,但该检测方法依赖对照品。液相色谱联用高分辨质谱仪作为检测工具,检测物质时不受紫外吸收的限制,同时能给出物质的精准分子质量、二级碎片离子图谱进行匹对鉴定物质,从而提高了检测物质的通量。

    本实验以秦岭-淮河为分界线划分桔梗的南、北产地,通过收集9个省(市)57批桔梗药材,采用UPLC-LTQ-Orbitrap-MS对其中皂苷成分进行鉴定及LC-MS/MS对其中10种皂苷成分进行定量,通过比较皂苷谱的差异对南北产地的桔梗药材加以区分,以期为桔梗药材质量控制提供参考。

    1 材料

    1.1 仪器

    LTQ Orbitrap XL型串联质谱仪(美国Thermo Fisher公司),TSQ Vantage型串联三重四级杆质谱仪(美国Thermo Fisher公司),UltiMate 3000型超高效液相色谱(美国Thermo Fisher公司),CPA225D型电子天平(德国Sartorius公司),Allegra 64Rcentrifuge型离心机(美国Beckman Coulter公司),KQ-500B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司),Millipore Synergy型超纯水系统(德国Merck公司) ......