王婷婷,戴仕林,刘潺潺,蒋征,吴啟南,3

    (1.南京中医药大学药学院,江苏 南京 210023;2.江苏省中药资源产业化过程协同创新中心,江苏 南京 210023;3.中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心,江苏 南京 210023)

    形态特征无明显差异的同种植物由于所含代谢物组成或含量的差异可被区分为不同的化学型,化学型是植物种内变异之一,体现了种内生物多样性[1]。化学型一般是由遗传因素和环境因素共同作用形成的,并且在药用植物中普遍存在。不同产地或不同品种间药用植物所含代谢物存在一定差异,进而对其药效产生影响。因此,化学型形成机制的研究对药材道地性的阐明、药材质量控制具有重要的理论意义和应用价值。

    菊科植物黄花蒿ArtemisiaannuaL.为一年生草本,干燥的全草入药为青蒿药材,有浓郁香气,是提取抗疟特效药青蒿素的原料。黄花蒿含有丰富的挥发性成分,以单萜、倍半萜为主,现有研究表明其具有良好的抗菌[2-5]、抗氧化[6-8]、解热[5]等作用。黄花蒿作为一种高抗逆性物种,分布广泛[9],不同地区的黄花蒿挥发性成分的组成和含量均差异明显,药理活性也各有侧重。

    江苏和河南均为青蒿药材的传统产区[10],并且江苏盱眙产青蒿药材是品牌中成药的原料药之一[11],两地药材挥发性成分研究对黄花蒿药用资源的利用具有重要意义。本研究通过顶空-气相色谱-三重四极杆串联质谱(HS-GC-QQQ-MS/MS)分析2个产地黄花蒿的挥发性成分,超快速高效液相色谱-三重四级杆飞行时间串联质谱(UFLC-Triple TOF-MS/MS)非靶向分析不同化学型差异代谢物,并采用转录组测序分析相关萜类成分基因表达,以期为黄花蒿化学型形成机制研究提供基础。

    1 材料

    1.1 仪器

    HS-GC-QQQ-MS/MS(7697A-7000C)(美国Agilent公司);SIL-20A XR超快速液相色谱仪(日本Shimadzu公司);Triple TOFTM5600 System-MS/MS高分辨四极杆飞行时间质谱仪(美国AB Sciex公司);万分之一电子分析天平(日本Shimadzu公司);SAGA-TY纯水机(南京易普易达科技发展有限公司);冷冻离心机(美国Beckman coulter公司);冷冻干燥机(美国Labconco公司);-80 ℃低温保存冰箱(青岛海尔生物医疗股份有限公司)。

    1.2 试药

    江苏产黄花蒿种子由江苏盱眙青蒿药材基地提供(北纬33.0°,东经118.48°),样品编号:JXAa;河南产黄花蒿种子由实验室在河南中牟县收集(北纬34.44°,东经113.94°),样品编号:HZAa;家庭园艺营养土(美乐棵);甲醇(美国Merck公司);乙腈(美国Merck公司);乙酸(上海阿拉丁生化科技股份有限公司) ......