丁杨,钱珊珊,郭健,桂双英

    (1.安徽中医药大学药学院,安徽 合肥 230012;2.安徽省中医药科学院药物制剂研究所,安徽 合肥 230012;3.现代药物制剂安徽省教育厅工程技术研究中心,安徽 合肥 230012;4.药物制剂技术与应用安徽省重点实验室，安徽 合肥 230012;5.安徽中医药大学第二附属医院,安徽 合肥 230061)

    青藤碱(Sinomenine)为中药青风藤的根茎中提取分离得到的一种生物碱单体,具有抗炎、镇痛、免疫抑制等药理活性[1-3],临床上用于治疗风湿、类风湿性关节炎[4-5]。青藤碱口服给药后存在生物利用度低、半衰期短、经体循环后到达病变部位药物含量少等缺点[6]。经皮给药系统避免了口服给药可能发生的肝脏首过效应和胃肠道降解失活,可以延长药物在体内的半衰期,增加局部药物浓度,从而提高药物生物利用度[7-8]。因此选用微乳凝胶作为青藤碱载体,并通过经皮给药方式给药,有助于提高青藤碱在病灶局部的有效药物浓度,发挥长效治疗作用。采用精准的技术方法监测青藤碱微乳凝胶(Sinomenine microemulsion gel,SMG)给药后的皮肤和血液中药物浓度,对于探究和评价SMG的经皮释药行为具有重要意义。

    微透析(Microdialysis)是一种生物取样技术,指在麻醉或活动状态的动物体内植入探针,联合运用HPLC、HPLC-MS等技术手段,检测灌流液中的药物浓度,实时、动态地监测药物成分在机体内的动态变化[9]。与传统药代动力学研究方法相比,双位点微透析技术不仅可以进行皮肤和血液的同步取样,还可以减少组织液取样损失和操作误差。此外,微透析在不影响动物正常生理状态下进行在体、在线取样,减少了动物使用量,降低了动物间个体差异所带来的实验误差[10-11]。因此,采用双位点同步微透析技术能够精准、真实地检测SMG经皮给药后皮肤和血液中的药物浓度。

    本研究首先建立了青藤碱微乳凝胶中青藤碱的UPLC含量测定方法,然后在大鼠腹部和颈部分别埋入线性探针和血液探针,采用双位点同步微透析技术进行SMG经皮给药后大鼠皮下和血液药代动力学研究,为青藤碱微乳凝胶的开发应用提供实验依据。

    1 材料

    1.1 仪器

    Waters Acquity UPLC?H-Class超高液相系统:包括四元泵洗脱系统、自动进样器、TUV可变波长紫外检测器和Empower色谱工作站(美国Waters公司);微透析系统:包括灌注器推进泵(CMA400 Syringe pump),灌注器(CMA 2.5 mL Exmire Microsyringe Ms-gan250),收集器(CMA470 Refrigerated fraction collector);线性微透析探针(CMA30,透析膜长度10 mm,膜直径0.24 mm,截留相对分子质量6 000 Da);血液微透析探针(MAB7,透析膜长度10 mm,膜直径0.6 mm,截留相对分子质量1 500 Da);85-2A型数显恒温磁力搅拌器(江苏金坛市金城国胜实验仪器厂);AG285电子天平(德国Sartorious);SevenMulti型pH测试仪[梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司] ......