刘欢欢,张婷,王敏,于银萍,苏联麟,季德,陆兔林,李林

    (1.南京中医药大学药学院,江苏 南京 210023;2.国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心,江苏 南京 210023)

    当归为伞形科植物当归AngeliaSinensis(Oliv.) Diels的干燥根,味甘,性温,归心、肝、脾经，具有补血活血、祛瘀生新的功效,被医家誉为“妇科要药”。《中国药典》2020年版主要利用其中的阿魏酸和挥发油含量测定对其进行质量评价[1],而当归单一化学成分的含量高低并不能直接指征当归饮片补血活血的药效优劣,因此该方法不能完全反映当归质量[2-4]。

    目前,中药及其饮片多以有限个成分的定性、定量分析来控制其质量优劣,部分品种甚至没有含量测定项,因此化学测定不能有效表征其药效水平,较难满足现代中医药的发展需求。如常用消食药鸡内金,《中国药典》2020年版对其质量评价仅限于性状、检查等常规的理化检测[1],与其关键生物活性相关性不高,难以准确反映其临床功效。黄伟等[5]建立了一种基于胃蛋白酶活性的鸡内金促消食效价测定法,能够直观反映鸡内金消食化积的临床功效,也为神曲、麦芽等消食类中药质量控制提供参考。因此,为更好保障中药饮片临床使用的安全有效,有必要在现有化学测定的基础上增加生物活性测定,以综合评价其质量。

    诸多研究显示,当归具有补血功效,主治血虚之症,可以有效改善贫血,其作用机制主要是促进造血祖细胞增殖,提高血红蛋白水平[6-10]。本实验拟结合血红蛋白检测技术,从补血活性层面探索建立当归饮片生物效价方法,从而在化学测定的基础上补充药效检定,以期完善当归现行质量标准体系,并为其他补血类中药生物活性测定及其质量控制提供新思路[11-13]。

    1 材料

    1.1 仪器

    INC0108型二氧化碳培养箱(德国Memmert);Synergy H1型多功能酶标仪(美国Biotek);FA1104N型电子天平(上海菁海仪器有限公司);Eclipse 80i型倒置显微镜(上海衡浩仪器有限公司)。

    1.2 试剂

    人类髓性白血病K562细胞、RPMI 1640细胞培养基(南京贝佳生物科技有限公司);胎牛血清(上海李记生物科技有限公司);CCK-8试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司);二甲基亚砜(DMSO,南京翼飞雪生物科技有限公司);氯化血红素(Hemin,上海源叶生物科技有限公司,5 g·瓶-1,纯度98%);过氧化氢(H2O2,国药集团化学试剂有限公司,批号:20160325,纯度30%);乙酸(上海申博化工有限公司,批号:1801101) ......