薛珊珊,柏璐,孙昕宸,吴拥军

    (1.南京中医药大学附属医院,江苏 南京 210029;2.南京中医药大学第一临床医学院,江苏 南京 210023)

    喉源性咳嗽[1]以阵发性咽痒,咳嗽难止为主要临床表现,遇冷风、油烟刺激加重,临床上常难以明确具体病因。现代医学提出咳嗽高敏综合征(Chronic cough hypersensitivity syndrome,CHS) 的概念[2],将本病归属于难治性咳嗽范畴,目前广泛认为神经源性炎症、神经重塑是咳嗽敏感性增高的重要机制[3]。近年研究发现,气道上皮感觉神经末梢的瞬时受体电位香草酸亚型1(Transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1) 在咳嗽反射高敏感过程中发挥了重要作用[4],TRPV1通路被激活后,白细胞介素(IL)-10等抗炎因子表达减少[5],IL-1β等促炎因子表达增加,促进释放P物质(Substance P,SP) 、神经激肽A(Neurokinin A, NKA) 、降钙素基因相关肽(Calcitonin gene-related peptide, CGRP) 等神经肽[6],形成气道神经源性炎症,进一步将兴奋传入中枢[7],促进中枢胶质细胞活化,并分泌细胞因子(IL-1β) 、神经生长因子(Nerve growth factor, NGF) 等相关因子,致咳嗽中枢敏化[8-9]。

    吴拥军教授师承国医大师干祖望教授,在继承其学术思想及喉源性咳嗽辨治经验基础上,创立祛风止咳方[10-11]应用于临床,前期临床研究显示,祛风止咳方能显著减少患者刺激性咳嗽,有效改善咽痒、咽干等伴随症状,提高患者生活质量[12],且复发少,有较好的临床疗效。为进一步探讨本方治疗喉咳的作用机制,本研究通过建立咳嗽敏感性增高豚鼠模型,观察给药前后豚鼠咳嗽次数,及对TRPV1通路激活后相关细胞因子、神经肽及中枢胶质细胞活化的影响。

    1 材料

    1.1 动物

    Hartley雄性豚鼠30只,体质量(250±20)g,3～4周龄,购自邳州市东方养殖有限公司,动物生产许可证号:SCXK(苏) 2022-0004。适应性饲养1周,12 h/12 h光照循环,自由进食用水,实验环境温度:(23±3) ℃,湿度:40%～70%,本研究经南京中医药大学动物实验伦理审查批准(伦理号:202206A009)。

    1.2 药物

    祛风止咳方:蜜麻黄120 g,荆芥120 g,杏仁200 g,蝉蜕60 g,蛇蜕60 g,桔梗120 g,苏子200 g,百部200 g,半夏120 g,枇杷叶200 g,款冬花200 g,金沸草200 g,乌梅200 g,甘草60 g,共计2 060 g,购自南京中医药大学附属医院,符合《中华人民共和国药典》(2020年版)要求,室温下浸泡30 min,加10倍量水煎煮1 h,纱布过滤后再次加10倍量水,煎煮40 min,合并滤液(100目滤网),浓缩至相对密度为1.20-1.25(80 ℃) 的清膏 ......