金天姿,罗子宸,3,许伟辰,种莹,时晨,单进军

    (1.南京中医药大学中医儿科学研究所,江苏 南京 210023;2.南京中医药大学医学代谢组学中心,江苏 南京 210023;3.南京中医药大学江苏省中药高效给药系统工程技术研究中心,江苏 南京 210023)

    非酒精性脂肪肝(NAFLD)已成为21世纪以来严重威胁人类健康的代谢性疾病之一,截至2020年底,NAFLD患病率高达25%,且逐年增加[1]。临床以除酒精和其他明确的损肝因素所致的肝细胞内脂肪过度沉积为主要特征作为NAFLD诊断标准,同时该病易恶化为非酒精性脂肪肝炎、肝纤维化、肝癌等[2]。NAFLD为肝系疾病,多由脾失健运,痰浊阻滞所致[3-4]。治疗多以健脾疏肝、散瘀化浊降脂为主[5],辅以利湿类药物,可健运脾胃、疏泄肝气,调整机体运化状态,抑制脂质积累[6]。

    健脾利湿方为仝小林院士所创,由山药、茯苓、薏苡仁三味中药组成,具有健脾、益气、渗湿之功效。临床研究表明,该方能够调节糖脂代谢,抑制患者体内脂质积累,缓解患者虚胖表型,改善患者体内代谢状态[7]。现采用高脂饮食诱导的NAFLD小鼠模型,进行健脾利湿方防治NAFLD的药效学评估,并运用脂质组学技术手段,从脂质代谢角度分析其潜在作用机制。

    1 材料

    1.1 动物

    SPF级雄性C57BL6/J小鼠18只,8周龄,体质量为18～20 g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,饲养于南京中医药大学实验动物中心。饲养条件:12 h昼夜循环,相对湿度50%～60%,温度(22±2)℃。适应性饲养1周后,给予高脂饮食进行造模12周。经南京中医药大学实验动物伦理委员会批准,伦理号:202103A009。

    1.2 仪器

    Vortex-Genie2涡旋震荡仪(美国Scientific industries公司);RETSCH球磨仪(德国Retsch公司);5427R高速冷冻离心机、Bio Photometer蛋白核酸分析仪、Matercycler gradient PCR自动系列化分析仪(德国Eppendorf公司);SPD1010离心浓缩挥干机、QuantStudio 7 Flex荧光定量PCR仪、UHPLC-Q-ExactiveOrbitrap/MS(美国Thermo公司);Allegra超高速冷冻离心机(美国Beckman公司);FA1004N万分之一分析天平(上海舜宇恒平科学仪器有限公司)。

    1.3 药物及试剂 ......