汤志锋,张云羽,石德志,高武锋,龚小文,嵇晶,黄仕文,程建明

    (1.南京中医药大学药学院,江苏 南京 210023;2.江苏省经典名方工程研究中心,江苏 南京 210023;3.南京中医药大学中医学院·中西医结合学院,江苏 南京 210023)

    经典名方温经汤出自《妇人大全良方》,该方由酒当归、川芎、芍药、桂心、牡丹皮、醋莪术、人参、炒甘草、酒牛膝9味药组成,为妇科调经的常用方,主要用于冲任虚寒而有瘀滞的月经不调[1]、痛经[2-3]、崩漏、不孕[4]等。《古代经典名方关键信息表(7首方剂)》[5](以下简称关键信息表)对其用法用量有明确规定“粉碎成粗粒,每服20 g,加水450 mL,煎至240 mL,去滓温服”。本团队在关键信息表颁布后,完成了资源考察、产地优选、药材和饮片的质量研究以及基准样品的制备工艺研究,并在此基础上对温经汤基准样品进行质量研究。

    目前温经汤的研究主要集中在临床应用方面,化学成分分析与指纹图谱的相关研究较少,尚未有关于温经汤基准样品化学成分分析与指纹图谱同时测定的相关报道。本方成分复杂,仅对部分指标性成分进行含量测定,难以代表全方,指纹图谱技术的运用能较为全面地表征复方复杂的化学成分信息[6-9],国家药监局药审中心发布的第36号文件[10]明确指出“指纹/图谱一般以相似度或特征峰相对保留时间、相对峰面积等为检测指标,主要成分在指纹/特征图谱中应尽可能得到指认,必要时应建立多张指纹/特征图谱”。目前温经汤的图谱研究尚未指认全方所用药味,本研究通过HPLC-Q-TOF/MS技术分析基准样品的化学成分组成,并采用HPLC-UV和HPLC-ELSD法建立温经汤基准样品的指纹图谱,首次归属了全方所有药味,为古代经典名方温经汤基准样品的质量控制和新药研发打下基础。

    1 材料

    1.1 仪器与试药

    Waters e2695高效液相色谱仪(美国Waters公司),Waters 2998 PDA检测器(美国Waters公司),Triple TOF 5600型质谱仪(美国SCIEX公司),TD6002C型电子天平(天津天马衡基仪器有限公司),AUW120D型电子分析天平(日本岛津公司),KH-300E型超声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司),FTS-10A液体加热器(潮州市一壶百饮电器实业有限公司),FW100型高速粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司)。

    甘草苷、甘草酸铵、芍药苷、桂皮醛、丹皮酚、阿魏酸、没食子酸、β-蜕皮甾酮、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1对照品(中国食品药品检定研究院,批号:111610-201607、110731-201720、110736-201035、110710-201821、110708-201407、110773-201313、110831-201906、111638-201706、110703-202034、110704-202129,纯度:93.1%、97.7%、97.7%、99.4%、99.9%、99.6%、91.5%、95.0%、94.0%、94.3%),人参皂苷Re、藁本内酯对照品(上海源叶生物科技有限公司,批号:B04D9S76499、R21J10F91128,纯度均≥98%) ......