缪蓉,周李煜,白丹丹,杨云君,陈艳冉,姜林宏,袁冬平,龙军,吉娟

    (1.南京中医药大学药学院,江苏 南京 210023;2.中国医学科学院皮肤病医院/中国医学科学院皮肤病研究所,江苏 南京 210042)

    动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是脂质沉积驱动的慢性炎症性疾病,机体亢进的免疫应答与脂质负载共同参与AS病变[1]。DNA甲基化是由DNA甲基转移酶家族催化,将甲基添加到CpG位点5′位置的胞嘧啶碳上的表观遗传修饰过程[2]。异常的DNA甲基化通过参与炎症形成、平滑肌增殖、脂代谢调控和血管损伤等过程在AS病程中发挥重要作用[3]。近年来研究发现中药复方可以对DNA甲基化进行调控从而干预疾病的进程,包括AS、肿瘤等[4-5]。中医理论认为,AS的病机是肝肾阴虚,痰浊瘀阻,瘀热蕴毒损脉[6]。养阴活血方是江苏省名老中医唐蜀华教授依据多年治疗AS的临床经验,以补益肝肾阴血、活血清热解毒并治为原则创立的复方。课题组前期在高脂饮食(High fat diet,HFD)联合HSP65免疫和HFD联合LPS注射诱导的2种ApoE-/-小鼠AS模型中发现养阴活血方对AS具有积极的治疗作用[7],这些作用与其调节免疫和炎症有密切关系。然而养阴活血方能否通过调节感染性炎症条件下DNA甲基化的酶水平来减轻AS尚不清楚。本研究在构建HFD联合LPS注射形成AS疾病模型[8]的基础上,研究养阴活血方对感染性炎症诱发的ApoE-/-AS小鼠DNA甲基化酶水平的影响。

    1 材料

    1.1 动物

    ApoE-/-小鼠(6～7周,18～22 g,雄性,SPF级),由南京大学-南京生物医药研究所提供,许可证号:SCXK(苏)2015-0001,饲养于南京中医药大学实验动物中心SPF级屏障环境。动物实验由南京中医药大学实验动物伦理委员会批准通过,伦理批号:201804A011。

    1.2 药物与试剂

    养阴活血方由制何首乌20 g,酒黄精10 g,虎杖30 g,漏芦30 g,姜黄10 g,红花10 g组成(江阴天江药业有限公司),批号:1511048、1512161、1510034、1506035、1507084、1512165。养阴单元由制何首乌、酒黄精组成,清热单元由虎杖、漏芦组成,活血单元由姜黄、红花组成。按前期报道方法制备养阴活血方及各功效单元[7],药物剂量(生药量)为:全方,18 g·kg-1;养阴,5 g·kg-1;清热,10 g·kg-1;活血,3.3 g·kg-1 ......