张心怡,邱雨轩,胡杨,田荣,赵勉,严辉,王吓长,胡立宏

    (1.南京中医药大学江苏省中药功效物质重点实验室,江苏 南京 210023;2.南京中医药大学药学院,江苏 南京 210023)

    中药辛夷为临床常用药材,《中国药典》2020年版规定辛夷为木兰科植物玉兰Magnoliadenudata、望春玉兰Magnoliabiondii或武当玉兰Magnoliasprengeri的干燥花蕾[1]。其味辛性温,归属于肺、胃经,具有发散风寒,通鼻窍的功效,主产于河南、四川、陕西、湖北等地[2],是兼药用及观赏价值的植物。化学研究表明,辛夷中有效成分主要包括金合欢醇、松油醇、樟脑等挥发油物质[3],具有抗炎[4]、抗氧化、抗菌等活性[5],还能够调节中枢系统,有助于提高记忆、提神醒脑[6]。但近年来辛夷药材存在混伪品较多、用药混乱、质量把控不过关等诸多问题,如采集样品中常混有紫玉兰、黄山木兰、二乔玉兰等近缘种药材,因它们的花被形状、大小以及数量较为相似,加大了鉴别难度[7]。此外,在生产实践中玉兰优良无性系常以嫁接方式进行扩大繁殖[8],不同来源的嫁接苗质量和成活率明显不同。因此,需要建立一种快速、简便、有效的方法鉴别辛夷药材,以确定其用药品种,保障临床用药安全。

    DNA条形码技术是通过一段标准的、有足够变异的、易扩增且相对较短的DNA片段对物种进行识别和鉴定的技术,该方法快速准确、易于操作,是对传统中药鉴定方法的补充[9]。常见的鉴定植物的DNA条形码有ITS、ITS2、psbA-trnH、matK和rbcL等序列。目前辛夷的DNA条形码仅有ITS序列的报道[10],本课题组前期多次对ITS序列扩增和测序,但PCR扩增成功率极低,故本研究采用ITS、ITS2、psbA-trnH、matK和rbcL五种DNA条形码序列对中药辛夷及其近缘种进行分子鉴定,以期为辛夷药材的分子鉴定提供科学依据。

    1 材料

    1.1 植物样品

    本研究于2022年8—10月分别于江苏南京、江苏宜兴、河南南阳、云南昆明等地采集玉兰植物样本,由南京中医药大学药学院严辉教授鉴定。提取采集到的21份玉兰植物样本DNA,并从Genbank网站下载玉兰和武当玉兰条形码序列,共计9个品种30份代表样本。样品信息详见表1。 ......