许奇,张洪榕,许炜民,钱佳佳,4,黄桂成

    (1.南京中医药大学第一临床医学院,江苏 南京 210023;2.安徽中医药大学中医学院,安徽 合肥 230038;3.安徽中医药大学医药信息工程学院,安徽 合肥 230038;4.南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院,江苏 南京 210023)

    骨关节炎(Osteoarthritis,OA)是一种持续进行性发展的关节退行性疾病,是老龄患者致残的主要原因[1]。在OA中,关节炎症是造成细胞外基质降解、氧化应激和软骨细胞凋亡的重要因素,会导致软骨侵蚀和骨损伤的发生[2-3]。已有大量的研究表明,炎症因子如IL-1β、IL-6、TNF-α等在OA的进展中发挥重要作用,可通过减少软骨细胞Ⅱ型胶原、聚集蛋白和细胞外基质成分的合成来破坏软骨细胞的代谢平衡[3]。因此,抑制或减轻软骨细胞中IL-1β和IL-1β诱导的炎症介质的表达是治疗OA进展的关键途径。

    高迁移率组蛋白B1(High mobility group box-1 protein,HMGB1)可作为趋化因子激活与炎症相关的各种信号转导途径,而针对HMGB1的特异性阻断可以抑制其诱导的炎症反应[4-6]。前期研究发现,HMGB1与OA的发病机理密切相关,其表达随着OA小鼠病程的进行性发展逐渐增加[7]。大量研究表明,HMGB1分泌至核外可作为促炎细胞因子激活核因子κB(Nuclear factor kappa B,NF-κB)信号传导途径,在软骨细胞中诱导OA样表型并促进炎症反应[8-9]。

    温经通络汤是江苏省名中医黄桂成教授的经验方,临床疗效确切,在改善患者炎症与减缓疼痛方面作用显著[10],但作用机制研究尚不完善。前期通过网络药理学筛查发现NF-κB信号通路是温经通络汤发挥OA治疗作用的有效通路之一[11]。因此,本研究拟从HMGB1/NF-κB通路入手,通过IL-1β诱导软骨细胞炎症模型,明确HMGB1对NF-κB通路的调控作用,并探讨温经通络汤发挥改善软骨细胞炎症的可能作用机制,以期为温经通络汤的临床应用提供实验依据。

    1 材料

    1.1 实验动物

    1周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠10只,8周龄SPF级SD大鼠10只,均自北京维通利华实验动物技术有限公司购入,实验动物许可证号:SCXK(京)2021-0006,饲养于南京中医药大学实验动物中心。实验通过南京中医药大学实验动物伦理委员会审核批准(202004A020)。

    1.2 实验药物 ......