阮芳,周惠芳

    (1.南京中医药大学第一临床医学院,江苏 南京 210023;2.南京中医药大学附属医院,江苏 南京 210029)

    黄体功能不全(Luteal phase defect,LPD)指排卵后黄体发育不全或过早退化,引起孕激素分泌不足、子宫内膜分泌反应不良,导致胚胎着床失败和发育障碍,与不孕、早期流产、月经不调等密切相关。LPD占不孕症病因的5%～10%[1],在辅助生殖技术(Assisted reproductive technology,ART)的过程中,LPD的发生率可达100%[2]。研究表明,子宫内膜容受性受损是LPD性不孕症患者的关键特征[3]。免疫反应是子宫容受性的重要介质[4],具有调节上皮-胚胎附着、蜕膜转化、滋养层侵袭、子宫血管适应、炎症激活和消退以及免疫耐受作用。调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞17(Th17)是CD4+T细胞的2个显著不同的亚群,在自身免疫、炎症和对外来抗原的免疫排斥方面具有相反的功能[5-6]。Treg细胞对植入成功至关重要,发挥着建立妊娠所必需的强大抗炎、免疫抑制和血管调节功能[7-8]。FOXP3是叉头样转录因子家族的成员之一,是Treg细胞发育和发挥免疫抑制功能所需的特异转录因子,FOXP3持续表达是Treg谱系稳定的先决条件[9]。FOXP3下降与不孕症相关[10],调节FOXP3可以减少Treg细胞向Th17细胞分化[11]。Th17细胞在TGF-β、IL-6、IL-23等多种细胞因子参与下发生活化,分泌白介素(IL)-17以及由RAR相关孤儿受体C(RORC)编码的“主调节因子”RORγT,参与炎症反应和自身免疫疾病的发生与发展。研究发现,IL-17的异常表达或Th17细胞正常百分比的改变可能是妊娠失败的潜在原因[12]。

    中医认为LPD性不孕症发病以肾为本,涉及肝郁、脾虚、气虚、血虚、阴虚和阳虚[13-15],治疗上以补肾为主。队列研究的荟萃分析显示,补肾类中药可在体外受精的基础上,进一步提高妊娠率至60%,较单纯体外受精的妊娠率显著提高[16]。补肾助孕方是由周惠芳教授数十年的临床经验凝练而成,具有补肾宁心,交通心肾之功。课题组前期研究证明补肾助孕方主要通过改善子宫内膜容受性,起到调经助孕的作用[17]。补肾助孕方广泛应用于不孕症、高泌乳素血症、多囊卵巢综合征等妇科疾病[18-20]。因此,本实验通过分析补肾助孕方对Treg/Th17细胞平衡的调控作用,为临床上治疗LPD型不孕症提供新策略和方向。

    1 材料

    1.1 实验动物 ......