石琨群,熊玥,钱香,朱育凤,姚毅,张倩,刘史佳

    (1.南京中医药大学附属医院/江苏省中医院药学部,江苏 南京 210029;2.南京中医药大学第一临床医学院,江苏 南京 210023;3.江苏省畜产品质量检验测试中心,江苏 南京 210036;4.宜兴市中医医院儿科,江苏 宜兴 214299)

    半夏为天南星科植物半夏Pinelliaternate(Thunb.) Breit.的干燥块茎,味辛、性温,有毒,归脾、胃、肺经,有燥湿化痰、降逆止呕、消痞散结的功效[1]。《中国药典》中收录的法半夏、姜半夏、清半夏,均为临床常用品种。陈丽君等[2]在810篇使用半夏的文献中发现,半夏炮制品的使用频率较高,共1 062次,占总次数的58.9%。不同炮制品的功效各有侧重:法半夏在炮制过程中辅以甘草,着重于祛寒痰;姜半夏为生半夏用水浸泡至内无干心时,加生姜与白矾共煮所得,着重于温中降逆止呕;清半夏是由白矾溶液浸泡或煮至内无干心得到,侧重于燥湿化痰[3]。尽管前期对半夏的化学成分研究较多,但尚未系统分析半夏及其炮制品的差异性成分,并挖掘差异性功效。本课题组前期已建立了半夏指纹图谱[4],并发现半夏炮制前后核苷类成分含量有显著差异。本文拟基于液质联用技术及多变量统计分析方法,对半夏及其炮制品的成分进行差异性分析并鉴定,进一步结合网络药理学分析半夏炮制前后不同的主要作用靶点,及差异性功效作用机制,为半夏及其炮制品的临床合理应用提供数据支持。

    1 材料与方法

    1.1 仪器

    ACQUITY UPLC超高效液相色谱仪配PDA检测器及Empower 3工作站(美国Waters公司);Triple TOF 4600超高效液相色谱-飞行时间高分辨质谱仪配OS及MasterView软件(美国SCIEX公司);FA1204型万分之一电子分析天平(常州市幸运电子设备有限公司);PL-S60T型数显超声波清洗机(东莞康士洁超声波科技有限公司);高速冷冻离心机(德国Eppendorf公司)。

    1.2 试剂

    乙酸、甲酸、乙腈均为色谱纯(德国Merck公司),纯水。

    1.3 样品

    半夏于当地农户处收集与市场购得后经生产加工,得其炮制品样品,由江苏省中医院朱育凤主任中药师鉴定为天南星科植物半夏Pinelliaternata(Thunb.)Breit.的干燥块茎。详细饮片信息见表1。

    1.4 溶液制备

    1.4.1 供试品溶液制备 取半夏及其炮制品样品粉末约2.0 g(过4号筛),精密称定,置50 mL具塞锥形瓶中,加入10 mL水,超声提取60 min(功率280 W,频率53 kHz),放冷后称定质量,用水补足减失质量,摇匀后过滤,取续滤液离心10 min(10 000 r·min-1),取上清液即得供试品溶液 ......