谢欢,宋选飞,周斌,刘耀,2,3,杨芳芳,2,3,陈迎龙,朱艳,张永萍,2,3

    (1.贵州中医药大学药学院,贵州 贵阳 550025;2.贵州省中药民族药炮制与制剂工程技术研究中心,贵州 贵阳 550025;3.国家苗药工程技术研究中心,贵州 贵阳 550025;4.贵州中医药大学针灸推拿学院,贵州 贵阳 550025;5.贵州健康职业学院中医药系,贵州 铜仁 554300)

    微透析是一种动态监测活体组织或器官中内源性物质和外源性物质的细胞外含量变化的技术[1],具有多位点实时采样、采样量小且所得样品纯净等诸多优点[2]。但由于微透析实验中采样量较少,待测物含量较低,为满足检测限要求,微透析常与各种灵敏度高的分析方法如UPLC、LC-MS/MS、HPLC-MS/MS、GC-MS等联用,这样不仅可以监测组织或器官的细胞外液中游离分子的水平,还可以阐明药物的体内过程及其组织或器官靶向性[3-4]。微透析技术最初旨在研究动物大脑中的内源性物质[5],但后来也逐渐应用于关节[6]、肝脏[7]、皮肤[8]、血液[9]等部位。

    苗医弩药针疗法是苗医外治法中的经典疗法[10],常用配方由生草乌、白龙须、黑骨藤、透骨香、大血藤5味药材组成。其中以热药为主,冷药为辅,五药合用共奏祛风除湿、散寒止痛、舒筋活络之功,用于治疗各种风湿疾病[11]。传统的弩药针制法粗犷,易造成交叉感染,且使用时患者疼痛感明显,顺应性较差;经改良后的弩药也有使用剂量不准确,可控性较差等缺点,极大地阻碍了其临床应用及推广。课题组前期已成功将弩药液制备成弩药微乳,可解决弩药针疗法易交叉感染、依从性差等缺点[12];同时,本课题组前期研究表明,弩药微乳经皮给药治疗膝骨关节炎模型大鼠具有较好的疗效,但其经皮给药后的药动学特征目前尚无研究。因此,本研究拟采用微透析实时采样技术结合UPLC,考察弩药微乳经皮给药后多种有效成分的皮肤药动学特征,以期为该制剂后续研究提供参考。

    1 材料

    1.1 仪器

    ACQUITY UPLC仪(Waters公司);瑞典CMA4004微透析系统(康森特生物科技有限公司);RYJ-12B透皮扩散仪(上海圣科仪器设备有限公司);DJ-A恒温磁力搅拌器(常州澳华仪器有限公司);DZF-6210真空干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司);HY-2雷磁涡旋仪(上海仪电科学股份有限公司);AUW1200型电子天平(SHIMADZU公司)。

    1.2 试药

    绿原酸对照品(批号:DSTDL002103)、苯甲酰新乌头原碱对照品(批号:DST230227-056)、杠柳毒苷对照品(批号:DSTDG004101)、新乌头碱对照品(批号:DSTDX002502),均购于成都德思特生物技术有限公司;黑骨藤、生草乌、大血藤、透骨香、白龙须均购于贵州省贵阳市花果园太升药材市场(批号:20220619,原产地均为贵州),由贵州中医药大学孙庆文教授对药材进行鉴定;肉豆蔻酸异丙酯(上海麦克林生化科技有限公司,批号:14114475);蓖麻油聚乙烯醚-35(罗恩试剂,批号:61791-12-6);乙腈(安徽天地高纯溶剂有限公司,批号:22055173) ......