王艳,高田田,王子颖,陈刚,陶伟伟

    (1.南京中医药大学中西医结合学院,江苏 南京 210023;2.暨南大学中医学院,广东 广州 510632)

    抑郁症是一种以持久的心境低落、快感缺失为主要临床表现的精神疾患,我国发病率为3.4%[1],WHO预测2030年抑郁症将成为全球疾病负担第一位的疾病。除精神症状外,69%的抑郁患者具有明显的躯体症状,其中胃肠道症状是其常见症状之一[2]。同时研究发现抑郁症是许多胃肠道疾病的常见合并症,胃肠道疾病患者具有更高的抑郁发病率[2]。两种疾病经常共存,彼此加重,因此,阐明抑郁患者胃肠道症状的发病机制,寻找有效的治疗靶点,对临床诊治具有重要意义。

    抑郁症属中医学“郁证”范畴,《金匮钩玄·六郁》记载:“凡郁皆在中焦”,中焦升降失常常致六郁,而越鞠丸是治疗六郁的代表方剂,具有散郁结,畅中焦之功效,临床常用于胃肠疾病及抑郁症的治疗[3-4]。前期研究发现,越鞠丸可通过调节海马垂体腺苷酸环化酶激活多肽(PACAP)发挥抗抑郁作用[5],但其对胃肠功能的影响尚未明确。

    PACAP是血管活性肠肽(VIP)、促胰液素、胰高血糖素家族的成员,在整个中枢、外周和胃肠神经系统中表达,可调节神经发育新陈代谢、胃肠运动、情绪和某些应激反应[6]。因此,本研究应用慢性不可预知温和应激(CUMS)方法构建抑郁和功能性消化不良小鼠共病模型,探讨越鞠丸对抑郁合并功能性消化不良的作用机制。

    1 材料

    1.1 动物

    SPF级雄性C57BL/6J小鼠65只,6～8周龄,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,动物生产许可证号:SCXK(京)2021-0006。在(22±2) ℃恒温恒湿环境、自由饮食、12 h昼夜交替的环境下饲养。

    1.2 实验药物

    越鞠丸组方川芎、苍术、香附、神曲、栀子购于南京中医药大学国医堂,上述5味药,各10 g,加入8倍量水煎煮1 h,过滤,加6倍量水再次煎煮1 h,合并2次药液,旋蒸浓缩,保存至-20 ℃备用。氟西汀(上海麦克林生化科技有限公司,批号:F844356),多潘立酮(上海麦克林生化科技有限公司,批号:D969490)。

    1.3 仪器与试剂

    1645050型蛋白电泳及转膜系统(Bio-Rad),Tanon-4600型凝胶成像系统(天能公司),X71型生物倒置显微镜(OLYMPUS)。VIP、IL-6、TNF-α、BDNF ELISA试剂盒(茁彩,货号:ZC-38836、ZC-37988、ZC-39024、ZC-38512),PACAP试剂盒(酶联,货号:ml002234),Vipr1(Proteintech,货号:14878-1-AP),Vipr2(Affinity,货号:DF5173),PAC1-R(Affinity,货号:DF7197),GAPDH(Proteintech,货号:10494-1-AP),Anti-rabbit IgG (H+L)(CST,货号:14708) ......