林伟雄,王寿富,陈仕妍,陈清怡,莫秋怡,吴晓英,张正,邓李红

    (广东一方制药有限公司,广东省中药配方颗粒企业重点实验室,广东 佛山 528244)

    五味子为木兰科植物五味子Schisandrachinensis(Turcz.) Baill.的干燥成熟果实,又称“北五味子”,在《神农本草经》中列为上品,主产于东北三省[1]。五味子具有益气生津,收敛固涩,补肾宁心的功效,用于治疗久咳虚喘、心悸失眠、自汗、盗汗、遗精遗尿等病症[2]。五味子具有悠久的用药历史及临床安全性,已被列入《可用于保健食品的物品名单》[3],其中所含的木脂素、有机酸及黄酮等[3-6]多种化学物质群具有明显的抗氧化效果[7-8],作为天然的抗氧化剂具有广阔的开发前景[9]。

    中药标准汤剂是基于中医理论与临床基础,经标准化工艺制备而成的水煎剂,作为中药配方颗粒工艺优化和质量控制的参照基准[10-11]。《中药配方颗粒质量控制与标准制定技术要求》提出,明确标准汤剂质量标准及其在制剂制备中的应用方法,有助于全过程把控中药制剂的整体内在质量,进而保障配方颗粒与临床汤剂用药和剂量的一致性[12]。目前,关于五味子标准汤剂的研究报道较少,仅有文献[13-15]涉及了相关质量标准的建立及评价研究,尚无针对标准汤剂中化学成分与抗氧化活性方面的相关性评价。中药水煎剂成分,作用靶点、途径以及药效规律复杂,单一的化学质量研究不能满足中药评价整体性、临床用药一致性的需求,因此,对中药进行多层次质量控制显得尤为重要[16]。本文以五味子标准汤剂为研究对象,结合超高效液相色谱(UPLC)法和一测多评(QAMS)法同时测定8种成分的含量,并基于抗氧化活性和成分指标的相关性评价,初步筛选抗氧化质量标志物;进一步针对候选成分进行分子对接以及抗氧化活性的单体验证,以确定合理的质量标志物。本文旨在为五味子标准汤剂的全面质量评价提供有效、客观、可行的方法。

    1 材料

    1.1 仪器

    MiliQ Direct 8型超纯水机(德国Merck公司);KQ-500DE型数控超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司);H-Class型UPLC仪(Empower3工作站,美国Waters公司);Thermo Vanquish型UPLC仪[赛默飞世尔科技(中国)有限公司];Agilent 1290 Infinity Ⅱ型UPLC仪(美国Agilent公司);UV-2600 probe型紫外-可见分光光度计(日本Shimadzu公司);ME204E型万分之一天平、XP26百万分之一天平(瑞士Mettler Toledo公司) ......