符秋雨,王飞虾,张峰,郑仕中,付金柏

    (1.南京中医药大学药学院,江苏 南京 210023;2.江苏省中医院药学部,江苏 南京 210029)

    肝纤维化是病毒性肝炎、酒精或非酒精性肝病、免疫性肝病、药物性肝病等的共同病理过程,其终末阶段将发展为肝硬化、肝衰竭或肝细胞癌[1-2],严重威胁人类的健康与生命,然而临床一直缺乏有效治疗药物。深入探究肝纤维化的发病机制具有重要意义[3]。在肝损伤期间,静息的肝星状细胞(Hepatic stellate cell,HSC)激活并转化为肌成纤维细胞后,促进细胞增殖、合成并分泌大量的细胞外基质(Extracellular matrix,ECM),过量的ECM导致肝纤维化[4]。现有的研究表明,抑制HSC活化增殖和诱导其凋亡是治疗肝纤维化的有效途径[5]。此外,在实验性纤维化逆转过程中观察到衰老的HSC胶原蛋白生成和增殖减少[6]。因此,诱导HSC衰老为肝纤维化的防治提供了新的方向[7]。

    肝脏作为重要代谢器官,对机体必需的多种物质与能量代谢过程有特异性调节作用,这也深刻影响肝脏病理变化[8]。从代谢调控的角度研究肝纤维化发病机制,有望获得特异性强的药物靶标,从而推动安全高效抗肝纤维化药物的研发。HSC活化是一个高度依赖物质与能量代谢的过程。有研究表明,静息的HSC和活化的HSC之间的代谢基因具有显著性差异,其中蛋白质代谢是HSC活化时的主要能量来源[9]。丙氨酸-丝氨酸-半胱氨酸转运载体2(Alanine-serine-cysteine transporter 2, ASCT2)作为谷氨酰胺主要转运载体,具有谷氨酰胺转运功能,是极具潜力的肝纤维化治疗靶标[10]。中药及其提取物等具有成分复杂多样、功能广泛、毒性低的独特优势,在抗纤维化治疗方面具有巨大的潜力[11]。白术内酯Ⅲ是在中药白术中发现的主要生物活性成分,已被证明具有抗氧化、抗肿瘤、抗过敏反应、抗菌作用[12]。但目前在临床上还缺乏白术内酯Ⅲ具有抗肝纤维化作用的研究,因此,我们需要进行大量的临床前实验证明白术内酯Ⅲ的抗肝纤维化作用以及机制。近期的研究发现白术内酯Ⅲ具有抗肠纤维化和肾纤维化的作用[13-14]。此外,我们课题组前期发现白术内酯Ⅲ是ASTC2的天然抑制剂,且通过抑制ASCT2发挥抗肝纤维化的作用[15],但白术内酯Ⅲ通过抑制ASCT2促进HSC衰老的机制仍需进一步研究。因此,我们拟研究白术内酯Ⅲ对ASCT2依赖性谷氨酰胺代谢诱导HSC衰老抗肝纤维化的作用机制。

    1 材料

    1.1 细胞株 ......