在内皮素－1诱导增殖的血管平滑肌细胞中骨桥蛋白的表达
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綦惠 商战平 王家富 北京大学医学部生理系 山东省泰山医学院 山东省泰山医学院
【摘要】目的观察在内皮素-1(ET-1)诱导增殖的人脐动脉平滑肌细胞(HUASMC)中骨桥蛋白(OPN)表达的变化。方法组织贴块法培养HUASMC后;随机分成5组,组1、组2、组3分别给予ET-1100nmol/L、10nmol/L、1nmol/L刺激48h,组4为不加ET-1的对照组,组5给予10μmol/LBQ123(ET-1A型受体的特异性拮抗剂)预处理后,再用10nmol/LET-1刺激48h,MTT比色法检测细胞在490nm的吸光度值(OD490),组间进行比较;免疫细胞化学方法检测OPN在不同组之间的表达,计算并比较表达的阳性率;分析OPN表达与HUASMC增殖的相关关系。结果ET-1剂量依赖性刺激HUASMC增殖,组间OD490比较有统计学意义(P0.01),BQ123可以抑制ET-1的作用;随ET-1浓度的升高,OPN表达阳性率升高(P0.01),给予BQ123预处理后,OPN表达的阳性率亦显著低于单独ET-1刺激组(P0.01)和对照组(P0.05);OPN表达阳性率与OD490值之间存在直线正相关(r=0.962,P0.01)。结论ET-1剂量依赖性刺激血管平滑肌细胞(VSMC)增殖,在ET-1诱导增殖的VSMC中OPN表达增加,OPN表达和HUASMC增殖之间存在直线正相关关系,检测VSMC中OPN的表达,对于VSMC增殖情况有一定预测价值。
【关键词】 内皮素- 血管平滑肌细胞 骨桥蛋白
【基金】山东省自然科学基金项目(No.Z2002C40)
【分类号】R543.3
骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是一种内分泌性非胶原型糖基化磷蛋白,和其他磷蛋白共同调节骨钙的沉积[1]。近年来的研究表明,OPN在心血管系统中起着重要作用,正常动脉壁中OPN几乎不表达,发生动脉粥样硬化(AS)时,其水平明显升高[2,3],可以诱导动脉粥样硬化饮食的小鼠主动脉发生脂
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摘要：目的 观察在内皮素-1(ET-1)诱导增殖的人脐动脉平滑肌细胞(HUASMC)中骨桥蛋白(OPN)表达的变化。方法 组织贴块法培养HUASMC后；随机分成5组，组1、组2、组3分别给予ET-1100 nmol/L、10 nmol/L、1 nmol/L刺激48 h，组4为不加ET-1的对照组，组5给予10 μmol/L BQ123(ET-1A型受体的特异性拮抗剂)预处理后，再用10nmol/L ET-1刺激48 h，ATT比色法检测细胞在490nm的吸光度值(OD490)，组间进行比较；免疫细胞化学方法检测OPN在不同组之间的表达，计算并比较表达的阳性生率；分析OPN表达与HUASMC增殖的相关关系。结果 ET-1剂量依赖性刺激HUASMC增殖，组间OD490比较有统计学意义(P
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