益母草生物碱对心肌梗死大鼠心功能及肌浆网钙泵的活性及其蛋白水平的影响(1)
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摘要：目的探讨益母草生物碱对大鼠心肌梗死后心功能保护作用的机制：方法 采用左冠状动脉前降支结扎制作大鼠心肌梗死模型，通过大鼠血流动力学指标以及心肌肌浆网钙泵的活性(SERCA2a)及其蛋白水平来反映益母草生物碱对大鼠心肌梗死后心功能的影响不明显(Pmax)，左室内压最大下降率(-dp/dtmax)。
1.4.2 大鼠心肌组织SERCA2a活性测定 取左心室肌组织5.0mg加0.5mL组织匀浆液(含PMSF)匀浆，4℃，12000r/min，离心5min，取上清液采用BCA法测定蛋白浓度，调节样品蛋白浓度至1000pg/mL。30℃水浴10 min，加入20pLATP，30s后加入20uL样品，混匀后45 s后测定OD值。每个样品均测定不同CaZ+浓度下的OD值，制作曲线后，计算最大值。
1.4.3大鼠心肌组织SERCA2a相对表达量测定样品制备同前。制备SDS-PAGE胶，蛋白上样量为50ug，分离胶用100 V电泳，电泳至溴酚蓝刚跑出即终止电泳。将胶片扫描后，通过图像分析软什测定日的条带及内参的光密度值，计算日的蛋白的表达量。
1.5统计学处理计量资料以均数±标准差(x±s)表示，多组间两两比较采用单因素方差分析。并且采用SPSS 12.0以及Prism 4.0生物医学统计软件分析和制图。
2 结果
2.1实验大鼠一般情况实验大鼠共62只，正常组10只，假结扎组12只，其中因手术意外死亡1只，其余40只大鼠于造模后3d之内死亡9只，存活31只，手术存活率为775%。动物实验结束后，因梗死面积不符合要求而排除的大鼠有4只，其中模型组2只，生物碱组2只。术后2周始，模型组大鼠逐渐出现毛发光泽不良，少数大鼠活动能力下降。
2.2各组大鼠动脉平均压、舒张压、收缩压及心率比较模型组大鼠动脉平均压、动脉舒张压均明显低于正常组与假结扎组(P0.05)。生物碱组大鼠动脉平均压、动脉收缩压、动脉舒张压以及心率与模型组及卡维地洛比较无统计学意义(P>0.05)。详见表1。
2.3各组大鼠血流动力学比较模型组大鼠左室收缩压、左室内压最大上升速率以及左室内压最大下降速率均明显低于假结扎组，而左室舒张未压却明显高于假结扎组与正常扎(P0.05)。详见表1。
2.4 各组人鼠心肌组织SERCA2a活性及含量比较 结果显示，模型组SERCA2a活性明显低于正常组及似结扎组(P
表2各组大鼠心肌组织SFRCA2a活性及含量比较(x±s)
[ 下 页 ], 百拇医药(姜水印)