膜片钳实验中心肌细胞快速分离方法分析
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张军 宋俊丽 武冬梅 山西医科大学;
【摘要】目的介绍一种膜片钳实验中简便、快速分离大鼠和豚鼠心肌细胞的方法,探讨影响细胞分离产量和质量的原因。方法迅速取出动物心脏,挂在Langendorff装置上,分别用无钙台式液和酶液进行灌流一段时间,然后剪取心室部分,置于KB液中将其剪碎吹打分散,筛网过滤将滤液放置在2℃~6℃冰箱中冷藏4h后可进行膜片钳实验。结果用此方法分离出的心肌细胞存活率高,结构完整,具有良好的耐钙性和较长的存活时间。结论控制好分离心肌细胞分离中的各种实验条件和熟练的实验操作,是分离出适合于膜片钳实验的心肌细胞的重要因素。
【关键词】 膜片钳 心肌细胞 大鼠 豚鼠
【基金】山西省回国留学人员科研基金资助项目(No.2007-42)
【分类号】R329
心肌细胞的分离是膜片钳实验当中重要的步骤。能否得到质量好、数量多的细胞是膜片钳实验能否顺利进行的关键因素。自从1969年Kono[1]首次报道了酶解法被运用于细胞分离以来,不少人在实验中对这种实验方法进行了改进[2,3],但分离后的细胞存活率和钙耐受性总是不稳定,因此直接
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摘要:目的 介绍一种膜片钳实验中简便、快速分离大鼠和豚鼠心肌细胞的方法。探讨影响细胞分离产量和质量的原因。方法 迅速取出动物心脏,挂在LanCendorff装置上,分别用无钙台式液和酶液进行灌流一段时间,然后剪取心宣部分,置于KB液中将其剪碎吹打分散,筛网过滤将滤液放置在2℃~6℃冰箱中冷藏4h后可进行膜片钳实验。结果 用此方法分离出的心肌细胞存活率高,结构完整,具有良好的耐钙性和较长的存活时间。结论 控制好分离心肌细胞分离中的各种实验条件和熟练的实验操作,是分离出适合于膜片钳实验的心肌细胞的重要因素。
关键词:膜片钳,心肌细胞;大鼠,豚鼠
中图分类号:R392.5 文献标识码:C 文章编号:1672-1349(2008)10-1238-02
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