丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注后凋亡诱导因子的影响
阳性细胞,1材料与方法,2结果,3讨论
王彦平,杨金升,范 磊,张明磊,司江华,曲传勇缺血性脑血管病是目前严重危害人类健康的主要疾病之一,脑缺血损伤是一个复杂的病理生理过程,其中再灌注损伤导致的神经元凋亡已经受到人们的广泛重视,如何减轻再灌注损伤成为治疗急性缺血性卒中的重要任务之一,本实验研究了丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响,以期为丹红注射液治疗缺血性脑血管病提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物 健康Wistar大鼠,鼠龄3个月~4个月,体重250 g~320 g,由兰州军区兰州总医院实验动物中心提供。
1.2 药物与试剂 丹红注射液由济南步长制药有限公司生产,AIF兔多克隆抗体(北京博奥森生物技术有限公司),即用型SABC免疫组化染色试剂盒(北京中杉生物技术有限公司),TUNEL凋亡检测试剂盒(Roche公司)。
1.3 方法 实验动物随机分为假手术组、局灶性脑缺血再灌注组(对照组)、丹红注射液治疗组(治疗组)。治疗组予丹红注射液5 mL/kg,于术前30 min腹腔注射,每日1次,连续5 d。对照组给予等量生理盐水。
1.4 动物模型的建立 模型制作根据Nagasawa等[1]的改良线栓法制成大鼠大脑中动脉缺血模型。用水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠后,将其仰卧固定,分离右侧颈总动脉(CCA)、颈内动脉(ICA)及颈外动脉(ECA),结扎ECA与CCA,用动脉夹夹闭CCA远心端后,迅速于ECA与ICA分叉下方剪一切口,将一预先用酒精灯烧成圆头的尼龙线插入颈内动脉,插入深度为(18.5±0.5)mm,直到有轻微阻力感为止,实现大脑中动脉阻塞导致脑缺血。结扎入口处,尼龙线外留约1 cm,缝合皮肤。2 h后轻轻提拉所留线头至略有阻力,实现大脑中动脉再灌注,造模完成。动物清醒后,出现Horner征,提尾右前肢屈曲或爬行向左侧转圈者为手术成功标志 ......
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